大学_生物化学_中_蛋白质的沉淀及变性_实验改进的探索.pdfVIP

第12 卷 第5 期 铜 仁 学 院 学 报 2010 年 9 月 Journal of Tongren University 大学《生物化学》中“蛋白质的沉淀及变性” 实验改进的探索 陈仕学 （铜仁学院 生物科学与化学系，贵州 铜仁 554300 ） 摘 要：对蛋白质的沉淀及变性实验进行了探索，结果表明：蛋白质溶液浓度适当是蛋白质发生盐析及沉 淀的前提，但操作方式也同样重要，操作时不宜振荡试管；对于乙醇引起蛋白质沉淀及变性的实验，则需调整 配制比例为新鲜鸡蛋清：水=1 ：6 ，同时需要改变试剂的添加顺序。采用上述调整后实验现象比较明显，改善 了实验教学效果。 关键词： 蛋白质； 沉淀； 变性； 实验改进 中图分类号：O6-3 文献标识码：A 文章编号：1673-9639 (2010) 05-0135-03 蛋白质的沉淀及变性实验是大学《生物化学》实验课中 2 ．1． 结果记录见表 1、表2 一个重要的实验内容，通过本实验能使学生掌握蛋白质产生 2 ．1．1． 各试剂与蛋白质溶液（按新鲜鸡蛋清：水=1 ：9 沉淀反应的原理，并且掌握蛋白质产生沉淀及变性的影响因 比例配制）的反应 素，加深对理论知识的理解，同时让学生明白蛋白质沉淀及 用新鲜鸡蛋清：水 1：9 比例配制的蛋白质溶液作为实 变性的应用。在实验教学过程中，笔者依照实验指导书中的 验材料，对蛋白质的盐析、重金属银沉淀蛋白质、有机酸沉 新鲜鸡蛋清：水=1 ：9 比例配制蛋白质溶液，与各种试剂反 淀蛋白质和有机溶剂沉淀蛋白质进行实验，并对其方法进行 应，并未看到有明显的沉淀产生，没有达到实验教学的预期 适当改进，结果见表 1。 目的。在此，笔者针对蛋白质溶液的比例和操作方式作了适 2 ．1．2 ． 不同比例的蛋白质溶液对乙醇引起的沉淀及变性 当的改进，并将其实验结果进行了总结。 分别用新鲜鸡蛋清：水=1 ：9 ；1：8 ；1：7 ；1：6 的 蛋白质溶液对乙醇引起的沉淀及变性进行实验。由实验可知， 1．试剂与方法 新鲜鸡蛋清：水=1 ：9 ；1：8 ；1：7 的蛋白质溶液对乙醇引 1．1． 试剂 起的沉淀及变性现象都不明显，即各部反应均无沉淀产生， 配制不同比例的蛋白质溶液，分别为新鲜鸡蛋清：水=1 ： 而且酸碱中和后也无沉淀产生，然而用新鲜鸡蛋清：水=1 ：6 9 ；1：8 ；1：7 ；1：6 。 比例配制的蛋白质溶液作为实验材料来做该实验，反应中各 1．2 ．操作方式 部现象都很明显。由此得出，所用蛋白质溶液中新鲜鸡蛋清： 1．2 ．1． 振荡和不振荡 水的最佳比例为 1：6，记录结果见表2 和表 3 。 1．2 ．2 ． 对试剂量的改进 2 ．2 ． 结果分析 1．2 ．3 ． 所加试剂先后顺序的改进 2 ．2 ．1． 对蛋白质试剂比例的改进 1．2 ．4 ． 石蕊