苜蓿雄性不育系花药愈伤形成及分化培养条件的研究.pdfVIP

第34卷第2期 中 国草地学报 2012年3月 Chinese Of Mar．2012 V01．34NO．2 JournalGrassland ’ 文章编号：1673-5021(2012)02-0041-06 苜蓿雄性不育系花药愈伤形成及分化培养条件的研究 高 霞，石风翎。，伊风艳，张 宇 (内蒙古农业大学生态环境学院，内蒙古呼和浩特010019) 摘要：以苜蓿雄性不育株系及其可育株系的花药为外植体，研究取材时间和不同激素配比对其愈伤维织诱导及 分化的影响。结果表明。雄性不育株系花药培养时，以现蕾初期取材、MS为基本培养基的条件下出愈率较理想。愈 伤组织诱导的适宜培养基为：MSq-0．5mg／L2，4--D+0．25mg／L6一BA-1-0．2mg／LNAA+3mg／LKT+3％蔗 KT+ 糖+0．7％琼脂(出愈率66．7％)，不育与可育植株花药愈伤适宜的分化培养基分别为：MS+lmg／L KT+o．2mg／LNAA+2％蔗糖+0．7％ 0．2mg／LNAA+z％蔗糖+0．7％琼脂(分化率75％)和MS+4mg／L 琼脂(分化率79％)。 关键词：苜蓿雄性不育系；花药；出愈率；分化率 中图分类号：$541 文献标识码：A 在作物遗传育种中，花药培养已经与常规杂交 裹1供试材料及其来源 1 育种、远缘杂交育种、诱变育种以及转基因技术互相 TableMaterials 结合，形成了一套高效的育种技术体系。有关苜蓿 可育花药的培养有较多报道，徐速利¨]用花药培养 获得了紫花苜蓿单倍体植株，Nedialkazagorska 等[2]通过低温和射线等预处理紫花苜蓿的花药也获 得了单倍体植株。苜蓿雄性不育株系通过组织培养 虽然已经解决了大田扦插繁殖成活率低的问题[3]， 但对苜蓿雄性不育株系花药组织培养的研究国内未 见报道。本研究采用不同培养基种类及激素配比的 方法，分析苜蓿雄性不育花药愈伤形成和分化诱导 过程中的影响因素，以筛选适宜的愈伤形成及分化 诱导的培养条件，为进一步获得苜蓿雄性不育的单 倍体植株及其纯系奠定基础。 1材料与方法 1．I试验材料 苜蓿雄性不育株系及其可育株系均种植于内蒙 古农业大学生态环境学院草业科学学科温室前试验 。 地。材料详见表1。 I．2试验方法 1．2．2花药愈伤组织诱导培养条件的试验设计 1．2．1材料预处理 愈伤组织的培养基激素配比采用4因素4水 分别在苜蓿开花末期和现蕾初期采集各材 料的花药。然后进行花药消毒：选择单核靠边期 -通讯作者．E-maillsfl0000@126．corn 收稿日期：2012-01-02·修回日期：2012-01-13 的花蕾…，流水冲洗30rain，分别用70％酒精和