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有关转基因黄瓜的研究综述 摘要：随着科技的进步，转基因生物已经逐渐充裕了我们的平常生活，而转基因黄瓜则为其中之一。以转基因黄瓜为例，对转基因黄瓜的研究进展以及对转基因食品的展望作一简要综述。 关键字：转基因黄瓜 转基因食品 研究进展 综述 Abstract：With the progress of science and technology, genetically modified organisms has gradually plenty of our common life, and transgenic cucumber is one of them. In transgenic cucumber as an example, the research progress of transgenic cucumber and the study of genetically modified food were reviewed briefly. Key words：Transgenic cucumber GMF research progress summarize 黄瓜属于葫芦科植物[1]，是我国主要的蔬菜作物之一。是我国保护地栽培面积最大的蔬菜作物。 黄瓜在生长过程中极易遭受各种病虫害及不利环境的影响[2]。黄瓜的产量和品质大大降低。选育优良品种是解决这些问题的关键，但由于现有种质资源的限制，采用常规育种方法很难在一些性状上有大的突破[3]。随着生物技术的发展及其在农业领域的广泛应用。应用基因工程技术有目的地改良性状。特别是采用常规育种方法无法改良的性状，创造黄瓜育种新种质。为黄瓜育种技术的创新提供了新的途径[4,5]。 一．转基因黄瓜的研究进展 1.黄瓜再生体系的研究 高效、稳定的再生体系是农杆菌介导的遗传转化的基础[6~8]。一般认为葫芦科植物组织培养难度较大，黄瓜组织培养开始得比较早[9]，但高频再生体系并不成熟；一些报道虽然有较高的再生频率，但因试材或其他原因重复性差[10,11]。一个适合转化的再生体系应具有外植体来源充足再生苗遗传稳定、再生能力强、易被农杆菌感染、具有适中的抗生素敏感性等特点。在黄瓜的再生研究中，研究者们对基因型、 激素组合、外植体类型、苗龄等因素做了大量研究[12~18]。 杜胜利用12个黄瓜材料做研究也发现基因型间差异显著，最高的芽再生率可达73％，最低的芽诱导率只有25％[19]。可见黄瓜基因型对再生的影响非常显著，选择适当的基因型对遗传转化研究的顺利进行相当重要。 MS基本培养基中添加的外源激素对黄瓜不定芽的诱导和生长起着重要的作用。基因型不同，对激素种类和相互配比的要求也不尽相同[20~21]。 组织培养中外植体对不定芽的再生影响很大，在黄瓜组织培养中研究人员使用的外植体类型很多。见于报道的有子叶、下胚轴、原生质体、真叶、花药、未受精的子房等。大多数的研究者认为子叶是黄瓜组织培养最好的外植体，子叶作为外植体的芽再生率高[22]。研究中发现不剥种皮的黄瓜播种后3—4 d苗龄的子叶芽分化率高，随着天数的增加不定芽分化率下降，下胚轴的芽再生能力明显偏低，在幼嫩的真叶上未见芽分化[23]。何晓明分别用子叶和下胚轴培养，芽的分化能力差别很大，认为外植体对芽的再生影响很大[24]。 2.黄瓜遗传转化研究进展 自1983年首次获得转基因烟草以来，至今至少已经获得近200种转基因作物，其中80 %以上是利用根癌农杆菌介导转化获得的。农杆菌转化的受体范围不但包括了双子叶植物和单子叶植物，而且扩展到了裸子植物(Wenck等) ，酵母(Bundock等)和真菌(De Groot.)， 甚至人类细胞(Kunik等)[25~28]。 早期的遗传转化是以发根农杆菌为工程菌介导的。Tmlson等采用发根农杆菌感染下胚轴。但由于毛状根再生的频率太低。只得到几株再生植株。随后施和平等阁采用发根农杆菌研究了黄瓜子叶外植体毛状根再生的情况。除此之外，未见更多的使用发根农杆菌对黄瓜进行遗传转化的报道。根癌农杆菌介导的遗传转化，因转化机理研究比较清楚，转化效率相对较高，目前为多数研究者所采用。是进行黄瓜转基因研究的主要方法[29,30]。 在黄瓜遗传转化中，影响黄瓜转化的因素很多，除影响植株再生的条件之外， 质粒载体的构建、 菌株类型、 细菌浓度、 感染时间、 共培养时间及温度、 酚类物质的分泌、 筛选抗生素类型等均起着重要作用。目前其他作物上普遍采用预培养几天、农杆菌侵染后共培养几天再进入抗性再生筛选的路线。在黄瓜农杆菌介导的转化研究中多数研究者采用了相似的路线，共培养后一般用头孢霉素(Cefotaxime, Cef)或梭节青霉素 （Carbenicillin, Cb)抑制根癌农杆菌的生长[31]。 黄