VEGF促进人黑素瘤SK-MEL-1细胞侵袭性的自分泌机制初探.pdfVIP

●9 己 第202126年卷3第3期 Mar．2012，Vo1．26，NO．3 · 论著 ·基础研究 VEGF促进人黑素瘤 SK．MEL．1细胞侵袭性的 自分泌机制初探 张金玲 ，王明 ，张丽娟 ，冯 刚 [摘 要] 目的 探讨血管 内皮生长因子 (VEGF)对人黑素瘤细胞 SK—MEL一1侵袭力以及对该细胞 中基质金属蛋 白 酶 9(MMP．9)的影响 ．初步研 究VEGF对肿瘤侵袭能力的影响及可能的作用机制。方法 使用VEGF体 外培养人黑素瘤SKMEL一1细胞，免疫组化法检测该细胞VEGFR一1水平：通过细胞体外侵袭实验检测细 胞侵袭能力的改变，再分别使用舍 20，40，80g／LVEGF培养液培养SK—MEL一1细胞，以正常培养 SK— MEL一1细胞为空白对照组 ，使用半定量 RT—PCR和Westernblot法对4组细胞 中MMP一9mRNA表达和 蛋 白水平进行分析 。 结果 VEGFR一1在 SKM．EL一1细胞胞核和胞浆 中均有表达。外加VEGF培养后 ， 细胞侵袭力明显增强(P0．01)；MMP一9mRNA表达和蛋 白水平在外加 VEGF组明显高于空 白对照组 ． 且高浓度和低浓度组之间差异有统计学意义(P均0．05)。 结论 人黑素瘤SK—MEL．1细胞系中存在有 自分泌机制 ．VEGF可通过 自分泌机制上调人黑素瘤 SK—MEL一1细胞 MMP一9mRNA表达及蛋 白水平．进 而促进肿瘤的侵 袭转移 [关键词] 黑素瘤 ；血管 内皮生长 因子 ；基质金属蛋 白酶一9；侵袭 [中图分类号] R739．5 [文献标识码] A [文章编号] 1001—7089(2012)03—0192—04 VascularEndothelialGrowthFactorPromotestheInvasionofHumanMalignantM elanomaSK-M EL-1Cellsvia anAutocrineMechanism ZHANGJin—ling，WANGYue2,ZHANGLi-jnan，FENGGang (1．DepartmentofCancer，Pu’aiHospital，Wahan430033，China；2．DepratmentofDermatology，No．1Hospital，Wuhan430022，China) [Abstract] Objective Toevaluatetheeffectsofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)oncellinvasionandmatrix metalloprotease一9(MMP一9)expressioninmalignantmelanomacelllineSK—MEL一1．M ethods Theexpres— sionofproteinofVEGFR一1intheSKM—EL一1cellswasdetectedbyImmunohistochemicalstaining．SK—MEL一 1cellswereincubatedwithdifferentconcentrationsofVEGF．Theinvasivecapacityofcellswasdetermined bycellinvasionassay．TheexpressionofMMP一9mRNA andproteinwasdetectedbyreversetranscription— polymerasechainreaction(RT—PCR)andWesternblotrespectively．Results TheexpressionofVEGTR一1 intheSK—MEL一1cellswasrerifiedbyimmunohistochemicalstaining． Comparedwithnomr alcontrolcells，