牙龈卟啉菌脂多糖诱导HL-60细胞分泌IL-1β、TNF—α、IL-6能力及其相关Toll样受体和信号通路的差异.pdfVIP

维普资讯 · 954 · 主堡 生堑堂 疫学杂志2007年lo月第27卷第lo期 ChinJMicmbi01Immun0l，oct0ber2007，v0l27。No．10 ． 坌田菌 学 ． 牙龈卟啉菌脂多糖诱导 HL一60细胞分泌 IL一1l3、TNF—、IL一6能力及其相关 Toll样 受体和信号通路的差异 张迪亚 严杰 李盛来 陈莉丽 【摘要 】 目的 探讨牙龈卟啉菌(Porphyromonas ，赡)脂多糖诱导人粒细胞HL-60分泌 IL-I~、TNF-a、IL-6能力差异及其相关 T0u样受体和信号通路。方法 采用酚水法提取牙龈卟啉菌 ATCC33277株脂多糖 (Pg—LPS)。采用 ELISA试剂盒定量检测 Pg—LPS作用的HL-60细胞分泌 IL-I~、 TNF-a和IL-6水平。采用 TLR2或TLR4单克隆抗体阻断试验联合ELISA检测 ，了解 Pg—LPS结合靶细 胞上Toll样受体的类型。采用 JNK、P38MAPK和NF-~B通路特异性阻断剂 的阻断试验联合 ELISA检 测，了解 段一LPS诱导 HL-60细胞分泌m-lt3、TNF-a和 IL-6的相关胞内信号传导通路。实验中采用大 肠杆菌 Oll1：B4脂多糖(E-LPS)作为对照。结果 1v~JnaPg—LPS分别作用2，4、48和48h或 1v~JnaE— LPS分别作用48、48和72h，HL-60细胞分泌的 L【广lB、TNF-a和 IL-6水平明显升高 (P0．01)；Pg—LPS 诱生的 a最高浓度与E-LPS相近 (P0．05)，但诱生的 【L广18和IL-6最高浓度明显高于 E—LPS(P 0．05)。TLR2单抗可抑制 Pg—LPS诱导 HL-60细胞分泌 【L广lB、 a或IL-6的活性(P0．05)，但 LPS诱导HL-60细胞分泌上述3种细胞因子的活性仅可被TLR4单抗所抑制(P0．05)。Pg—LPS诱导 HL-60细胞分泌 L【广18、TNF-a和 IL-6的信号通路分别为JNK和 NF_KB、JNK和 P38MAPK及 NF-~B、JNK 和P38 (P0．05)，E-LPS则分别为JNK和 P38MAPK及 NF_KB、P38MAPK和 NF_KB、P38MAPK和 NF-~B(P0．05)。结论 Pg—LPS诱导HL-60细胞分泌 IL-I~、TNF-a和 IL-6活性高于E-LPS。TLR2和 TLR4分别可能是 Pg—LPS和E-LPS的受体。Pg．LPS诱导 HL-60细胞合成上述细胞因子的信号传导通 路与E-LPS明显不同，不同细胞因子合成的胞内信号传导通路也不尽相同。 【关键词 】 牙龈卟啉菌；脂多糖；HL-60细胞；细胞因子；LPS受体；信号传导通路 Diver~tyofPorphyromonadgingivalislipopolysaccharideinducedn．-ip．1[NF-nandIL-6levelsinHL-60 cellsandtheassociated T栅 -Hkereceptorsand~gaalingpathways 删 ⅣGDi-ya ， ， ， CHENLi-li． DepartmentofSwma~logy， Second锄 删 Hospital，CollegeofMedicine，ZhejiangUni· 娜 ，Ha~ ou310009，China Correspondingallt~r：a扭 Ⅳ 一li，Email：yanchen 5 7@ 3．com 一 【Abar~ 】 Objective TodeterminethediversityofPorphyromonadgingivalis(咯)lipopolysaccharide inducedⅡ，18，1NF．aandIL-6