大鼠肝星状细胞系的建立及其生物学特性的研究.pdfVIP

第 34 卷 　第 3 期 解 　剖 　学 　报 Vol34 ,No3 2003 年 6 月 ACTA ANATOMICA SINICA Jun . 2003 大鼠肝星状细胞系的建立及其生物学特性的研究 冷希圣 　翁山耕 　李涛 　魏玉华 　彭吉润 　杜如昱 (北京大学人民医院肝胆外科中心 ,北京 　100044) ( ) 　　[摘要] 　目的　建立并鉴定肝星状细胞 HSC 细胞系 。　方法 　采用肝脏离体胶原酶灌注消化及密度梯度离 心的方法分离培养大鼠的 HSC ;通过体外长期传代培养后建立 1 株细胞系 ,应用细胞形态学观察 、细胞倍增时间测 定 、细胞生长曲线绘制 、染色体分析 、双层软琼脂培养 、免疫细胞化学检测 、RTPCR 检测 、聚硅酮膜培养法观测 HSC 的收缩等方法对其生物学特性进行研究 。　结果 　HSC 细胞系已传了 78 代 ,保持着肌成纤维样细胞的形态学特 点 。细胞倍增时间为 365 h ;细胞的染色体众数 42 条 ,为正常大鼠体细胞的染色体表型 ;双层软琼脂培养未见细胞 α α 克隆形成 ; 免疫细胞化学检测表明 ,细胞系表达 Desmin 、GFAP 、Ⅰ型胶原 、Ⅲ型胶原 、SMA 、iNOS 、ICAM1 、TGF ; β RTPCR检测表明 ,该细胞系表达 TGF 、ICAM1 ;聚硅酮膜培养法显示 ,HSC 细胞系能在 ET1 作用下产生收缩反应 。 结论 　HSC 细胞系符合建系标准 ,是 1 株新建立的大鼠肝星状细胞系 ,命名为 rHSC99 ,可作为肝硬化 、门静脉高压 症实验研究的模型 。 [ 关键词] 　大鼠肝星状细胞系 ;细胞系 ;细胞培养 ;大鼠 ( ) [ 中图分类号] 　Q228 　[文献标识码] 　A 　[文章编号] 2003 03269 ESTABL ISHMENT OF A NEW RAT HEPATIC STELLATE CELL L INE r HSC99 WITH CHARACTERISTICS OF MYOFIBROBLAST CELL 1 LEN G Xisheng , WEN G Shangeng , LI Tao , WEI Yuhua , PEN GJirun , DU Ruyu ( ) Dep artment of Hep atobiliary S urgery , Peking University People ’s Hospital , Beij ing 　100044 , China [ Abstract ] 　Objective 　To establish and identify a new rat hepatic