基因工程重组抗体技术的研究进展.pdfVIP

广东畜牧兽医科技2010年(第35卷)第5期 专题综述 ·3· 基因工程重组抗体技术的研究进展 邝贞结 (广东永顺生物制药有限公司，广东广州511356) 摘要：经历了多克隆抗体技术、杂交瘤单克隆抗体技术后，基因工程抗体技术发展十分迅速，应用 也越来越广泛。本文介绍基因工程重组抗体技术的研究进展。 关键词：基因工程抗体；进展 中图分类号：S813 文献标识码：A 文章编号：1005—8567(2010)05—0003-04 在抗体研究的漫长过程中，相继发展了三代 疫球蛋白分子基因导入细胞进行表达。由该技术 不同水平的抗体制备技术。其中以抗原免疫高等 所得的抗体去除或减少了无关结构，保留(或增 脊椎动物制备的多克隆抗体，称为第一代抗体： 加)了天然抗体的特异性和生物学活性，降低或基 通过杂交瘤技术生产的只针对某一种特定抗原 本消除抗体的免疫原性，减低抗体中鼠源成分的 决定簇的单克隆抗体，称为第二代抗体；应用重 同时保留原有抗体的特异性。对现有的优良鼠单 组DNA技术或是基因突变的方法改造某种抗体 抗基因进行改造，所得的抗体人源化程度高，生产 基因的编码序列，使之产生出自然界中原本存在 工艺简单，廉价易得，且容易获得稀有抗体，临床 的抗体蛋白质分子叫做基因工程抗体，即第三代 应用前景广阔。 抗体。这种基因工程称为抗体工程(antibody1984年，Morrison等创立了鼠／人嵌合抗体 engineering)[1]。 技术，该技术使得基因工程抗体技术得到了进一 Kohler等r2]于1975年创立的B淋巴细胞杂步的发展。在第三代抗体中主要包括人源化抗体、 交瘤单克隆抗体(Monoclonal antibody，McAb)技小分子抗体、抗体融合蛋白及某些特殊类型抗体 术，使抗体技术的研究和应用有了重大突破。该技 等，从一定程度克服了前两代抗体技术的不足。另 术已在疾病的研究、诊断、治疗中得到了广泛的应 外，噬菌体抗体库、核糖体展示文库等的构建使得 用。尽管如此，单克隆抗体作为异种蛋白，应用于 不经抗原免疫就可获得特异性抗体。 机体会受到免疫系统的限制，产生强烈的免疫应 1 人源化的基因工程抗体 答。另外，杂交瘤技术还有许多不足之处，如生产 人们早期曾尝试用人杂交瘤细胞来生产人单 的单抗分子体积过大，与靶抗原的亲和力不够，不 克隆抗体，但是由于人杂交瘤细胞的不稳定性、人 同的抗原需要单独接种单抗，细胞融合技术难度 单克隆抗体的低亲和力和伦理争议等方面的原因 高、效率低。最主要的是，单克隆抗体应用于人体 导致该技术很少被应用[4]。 疾病治疗时，使用单抗两周内就会对其产生免疫 1．1 嵌合抗体 降低鼠源单克隆抗体免疫原性 anti-mouseant 反应(human ibody，HAMA)[引。这 的一种方法是将鼠免疫球蛋白的可变区部分链接 使得传统单克隆抗体技术制备的抗体在应用上受 到相应的人免疫球蛋白的恒定区[副，这样就产生 到了极大的制约，无法充分发挥其在疾病防控方 了鼠／人嵌合抗体，人源区域在60％～70％。应用 面的作用。因此，基因工程技术及抗体分子遗传学 重组DNA技术，将鼠源单抗的可变区基因与人的 应运而生，并得到了进一步的发展。在20世纪80恒定区基因连接，构建的嵌合基因插入适当的表 年代中期出现新技术将免疫球蛋白的基因结构和 达质粒，转染相应的细胞后表达。所产生的嵌合抗 功能同DNA重组技术结合起来，再将重组后的免 体具有结合抗原的