灯盏花素对自然衰老小鼠的脑保护作用.pdfVIP

. . 时珍国医国药年第 卷第 期 灯盏花素对自然衰老小鼠的脑保护作用 王永丽 ,魏 芳 ,韩 璇.河北大学附属医院,河北保定; .河北大学公共卫生学院,河北保定 ; .河北大学基础医学院,河北保定 摘要:目的观察灯盏花素对自然衰老小鼠学习记忆能力、脑组织生化指标及脑细胞形态的影响,探讨灯盏花素对老龄小 鼠的脑保护作用。方法 选用雄性自然衰老 小鼠,用跳台仪测试学习记忆能力;用生化法测定、和 ;脑 组织切片,观察海马神经元损伤状况。结果 灯盏花素能明显降低小鼠错误次数,延长错误潜伏期;显著提高脑组织 活性,降低含量;明显降低脑组织 活性;减少海马区细胞的损伤。结论 灯盏花素能改善老龄小鼠的学习 记忆功能,对自然衰老小鼠具有脑保护作用,其机制可能与提高活性、降低脑组织脂质过氧化物的含量、抑制活性有关、保护海马区神经元有关。 关键词:灯盏花素; 学习记忆;抗氧化;脑保护 标识: : . / . . . . . 中图分类号: . 文献标识码: 文章编号:? 灯盏花素是从灯盏花中提取的黄酮类有效成分,具有散寒解 跳下次数即遭受的电击数 错误次数,; 后 表、祛风除湿、温络止痛之功效。有研究显示灯盏花素对脑缺血 将小鼠再次放于反应箱内,记录同样数据,作为记忆测试成绩。 再灌注后脑损伤及创伤性脑损伤、 一半乳糖诱导小鼠衰老以及 试验中若反应时间超过 以 计。 东莨菪碱与乙醇所致的大鼠、小鼠学习记忆障碍具有明显的改善 . 脑组织匀浆中生化指标的测定 断头处死小鼠,冰盘上迅速 作用 。但是目前就灯盏花素对学习记忆障碍改善的机制,尤 取脑,置冰冷生理盐水中冲洗掉血液,滤纸吸干水分,分析天平称 其是对衰老或痴呆病理过程中学习记忆功能的重要区域??海 湿重,用玻璃匀浆器在冰浴下加生理盐水研磨制成质量分数为 马部位是否有特殊的影响还不清楚。本研究采用老龄小鼠自然 %的脑组织匀浆液,置于 ℃低温离心机中, / 离心 衰老的模型观察小鼠学习记忆能力在衰老过程中的异常改变;并,取上清低温分装保存,采用硫代巴比妥酸法测定含 通过灯盏花素的干预,观察其对小鼠学习记忆能力的改善作用以 量、黄嘌呤氧化酶比色法测定活性、三硝基苯比色法测定 及与学习记忆功能相关的大脑海马神经元形态改变。在此基础 活性 按试剂盒说明书操作 。 之上通过分析脑组织中 、、 等生化指标与神经递质 . 组织形态学方法 小鼠取脑后,冠状切取前卤后 ? 等的活性变化,探究灯盏花素对自然衰老小鼠的脑保护作用。 脑组织块,迅速用 %多聚甲醛固定; 后 ./ 冲 材料与仪器 洗 次, %一 %酒精常规浓度梯度脱水,二甲苯中透明两 . 药物及试剂 灯盏花素,杭州民生制药厂提供;尼莫地平,石 次,人石蜡内进行包埋;将修好的蜡块固定于石蜡切片机上连续 家庄华龙药业有限公司提供;、、、试剂盒由南京建 切片,厚度为 ,常规 染色。然后于显微镜下观察海马神 成生物工程研究所提供;其它试剂均为国产分析纯。 经元损伤状况。于高倍镜下计数海马区每平方毫米的锥体 . 动物老龄小鼠, ~ 月龄,体质量 ? ,考虑到 细胞数。 雌激素有抗老年痴呆的作用,所以本实验只选用雄性动物,由河 . 统计学处理 各组计量资料结果均采用 ± 表示,用 北省实验动物中心提供。. 软件进行统计分析,各试验组之间比较,方差齐者采用 . 仪器 一 型小鼠跳台条件反射仪中国医学科学院药物 单因素方差分析 检验;方差不齐者采用非参数检验。同组间给 研究所 一 紫外可见分光光度计,北京普析通用仪器有限 药前后比较采用配对 检验。 责任公司;光学显微镜,日本;电热培养箱,重庆实 结果 验设备厂; 一 病理图文分析系统,日本 。 . 灯盏花素对老龄小鼠学习记忆的影响 由表 与图 、 可 方法 以看出,与老龄对照组动物比较,阳性对照药物尼莫地 . 自然衰老小鼠的筛选与药物干预老龄小鼠 ? 月龄 平及灯盏花素均能明显延长小鼠错误潜伏期,降低错误次数,而 通过跳台试验进行测试,筛选出学习记忆实验中错误潜伏期较 两者均有明显的统计学意义. 。但是两种药物间比较 长,错误次数较多,反应迟钝的 只小鼠用于实验。挑选出的 没有显著差异。只小鼠,按体质量随机分成 组,每组 只,其中两组分别灌 表 灯盏花素对老龄小鼠跳台实验的影响 ± 胃给予灯盏花素 ./?, ./ ?两个剂 量,阳性对照药组灌胃给予 . / 尼莫地平溶液,空白 对照组 灌胃给予等容积生理盐水,每日给药 次,灌胃 容积 . / 体质量,连续给药 。 . 学习记忆功能训练与测试 通过跳台试验检测动物学习记 忆能力。末次给药后 进行学习训练,记录小鼠第一次跳下平 台的时间此为触电潜伏期 即错误潜伏期 、 内 与组比较, . : . 灯盏花素对老