人骨髓间充质干细胞的分离培育及血管内皮生长因子对其体外诱导分化作用.pdfVIP

5·96 · 中国免疫学杂志2004 年第 20 卷 人骨髓间充质干细胞的分离培养及血管内皮生长因子 对其体外诱导分化作用① 何 　旭 　刘丹丹 　王 　阳 　郭 　新 　李玉林 ( 吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室 ,长春 130021) 　　中国图书分类号 　R3921 　　文献标识码 　A 　　文章编号 　1000484X( 2004) ( ) [摘 　要] 　目的 :分离和培养人骨髓间充质干细胞 mesenchymal stem cells ,MSCs 并检测其免疫学表型 ,探讨血管内皮生长 ( ) 因子 vascular endothelial growth factor ,VEGF 对其体外诱导分化作用。方法 :利用 Percoll 梯度分离、贴壁筛选法及单克隆培养法 分离、培养、扩增 MSCs ;采用免疫荧光和流式细胞术检测 MSCs 免疫学表型 ;通过 VEGF165 基因转染分析 MSCs 的表型变化。 结果 :体外分离、培养出高度同源性的 MSCs ;MSCs 具有独特的细胞免疫学表型 , 即 CD44 ,CD29 ,ckit 阳性 ,CD34 ,CD31 ,CD54 阴 性 ;VEGF165 诱导后 CD44 表达明显降低 ,CD31 显著升高 ,MSCs 向内皮分化。结论 :成功建立人 MSCs 分离培养方法 ,探讨了 MSCs 细胞免疫学表型及 VEGF 对它的内皮诱导分化作用 ,为 MSCs 的应用提供理论基础。 [ 关键词] 　骨髓间充质干细胞 ;血管内皮生长因子 ;免疫荧光 ;激光扫描共聚焦显微镜 ;流式细胞术 Isolation , culture of human bone marrow mesenchymal stem cells and induced dif ferentiation of VEGF in vitro HE Xu ,LIU DanDan , WANG Yang , GUO Xin ,LI YuLin . The Key Laboratory of Pathobiology , the Ministry of Science , the School of Basic Medica Science , Jilin University , Changchun 130021 , China ( ) [ Abstract ] 　Objective :To isolate and culture human bone mesenchymal stem cells MSCs and detect their immunophenotypes and in vestigate the induced differentiation of VEGF in vitro. Methods :MSCs were isolated ,cultured and proliferated by Percoll gradient centrifugation , adherence to plastic flask and monoclonal culture. Immunophenotypes of MSCs were detected by immunofluorescence and flow cytometry tech niques and also analyzed after VEGF165 transfection. Results : High homogenous MSCs had been isolated and cultured in vitro. MSCs had unique immunophenotypes and they were positive for CD44 ,CD29 ,ckit but