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第十一单元 生物技术实践
学案58 微生物的培养与应用
考纲要求 1.微生物的分离和培养 实验与探究
2.某种微生物数量的测定 实验与探究
3. 培养基对微生物的选择作用 实验与探究
4.用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用 实验与探究
复习要求
1.理解培养基对微生物的选择利用并能利用选择培养基分离微生物
2.掌握培养微生物的过程、条件和方法
3.掌握测量微生物数量的方法、统计菌落数量的方法
4.能利用选择培养基分离微生物的方法
基础自查
一、微生物的实验室培养
1.培养基
(1)概念: 。
(2)成分:
2.无菌技术
3.实验操作
(1)牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备
(2)微生物的分离方法
二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1.分离原理:
统计菌落数目:
3.实验流程:
三、分解纤维素的微生物的分离
1.纤维素酶
2.纤维素分解菌的筛选原理
3.土壤中纤维素分解菌的筛选实验流程
课堂深化探究
一.微生物的培养与应用
1.微生物的实验室培养
(1)培养基
①概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
②分类和应用
划分标准 培养基种类 特 点 用 途 物理
性质 液体培养基 半固体培养基 固体培养基 化学
成分 天然培养基 合成培养基 用途 选择培养基 鉴别培养基 ③培养基配方及营养要素
基本营养要素:
营养要素 来源 功能 碳源 无机氮源 有机碳源 氮源 无机氮源 有机碳源 生长因子 特别提醒 ①微生物最常用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。
②对异养微生物来说,含C、H、O、N的有机化合物既是碳源,又是氮源、能源。
③有些培养基不需要添加特殊营养物质,生物自己能合成,如大肠杆菌能合成某些维生素,作为特殊营养物质。
④制备:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
(2)微生物培养的无菌技术
①消毒和灭菌的区别
使用方法 结 果 常用的方法 消毒
灭菌
②三种常用灭菌方法的比较
灭菌方法 适用材料或用具 灭菌条件 灭菌时间 灼烧灭菌
干热灭菌
高压蒸汽灭菌 2.微生物的纯化培养及菌种的保藏
(1)原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
(2)方法:平板划线法、稀释涂布平板法。
方法 平板划线法 稀释涂布平板法 注意事项 (1)接种环的灼烧
①第一次划线前:
②每次划线前:
③划线结束后:
灼烧接种环之后
(3)划线时最后一区域不要与第一区域相连
(4)划线用力要大小适当,防止
(1)稀释操作时:每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌;操作时,试管口和移液管应在离火焰1 cm~2 cm处
(2)涂布平板时
①涂布器用体积分数为70%酒精消毒,取出时,让多余酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃
②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精
③酒精灯与培养皿距离要合适,移液管管头不要接触任何物体 目的 培养 二、特定微生物的数量的测定
1.测定微生物数量的方法
(1)直接计数法:常用的是 。
(2)间接计数法:常用的是 。
2.测定微生物数量方法的实际应用
(1)土壤中好氧型细菌的计数
(2)检测天然水源中细菌总数和大肠杆菌菌落数
细菌总数通常是 。大肠杆菌菌落数通常是指
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