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分子生物学整理 2013/12/10 根据每份PPT后的老师给的题目整理的，据说考试不超过那个范围，大家认真复习，若有错误的地方，请积极批评指正！！！ 第一份PPT 分子生物学：是研究核酸、蛋白质等生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学，是人类从分子水平上正式揭示生物界的奥秘，有被动地适应自然界转为主动地改造和重组自然界的基础学科。 生物大分子（ biomacromolecule ）：主要包括核酸（DNA和RNA）、蛋白质、多糖等，其主要特征是由小分子的构件分子（如：核苷酸、氨基酸、单糖等）组成，具有较复杂的空间结构，而且空间结构与其生物活性密切相关。 DNA重组技术（又称基因工程）是指将外源基因通过体外重组后导入受体细胞，并使其能在受体细胞内复制和表达的技术。 结构分子生物学：研究生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的学科。 基因组（Genome）：是生物体内遗传信息的集合，是某个特定物种细胞内全部DNA分子的总和。 基因组计划（ genome project）：以获得某物种基因组全序列为主要目标的科学计划。 基因组学（genomics）：是指研究基因组结构和功能的科学，包括基因组作图、核苷酸序列测定、基因定位及基因功能分析等。 结构基因组学（structural genomics）：以全基因组测序为目标，以建立生物体高分辨率遗传、物理和转录图谱为主。 功能基因组学（functional genomics）：以基因功能鉴定为目标，根据结构基因组学提供的信息，以高通量、大规模的实验方法，借助计算机分析，系统地对基因功能进行诠释。 生物信息学是以生物大分子为研究对象，以计算机为工具，运用数学和信息科学的观点、理论和方法去研究生命现象，组织和分析呈指数级增长的生物信息数据的一门科学。 什么是分子生物学？其研究对象是什么？ 分子生物学：是研究核酸、蛋白质等生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学，是人类从分子水平上真正揭示生物世界的奥秘，由被动地适应自然界转向主动地改造和重组自然界的基础学科。 研究对象：生物大分子（ biomacromolecule ）：主要包括核酸（DNA和RNA）、蛋白质、多糖等，其主要特征是由小分子的构件分子（如：核苷酸、氨基酸、单糖等）组成，具有较复杂的空间结构，而且空间结构与其生物活性密切相关。 试举出5例分子生物学发展史上的重要科学事件 Charles Darwin进化论：物竞天择，适者生存 施旺细胞学说：动植物都是由细胞组成的。 Gregor Mendel经典遗传学：遗传因子 Morgan基因学说 Watson和CrickDNA双螺旋模型：里程碑 什么是DNA重组技术？有何应用？ DNA重组技术（又称基因工程）是指将外源基因通过体外重组后导入受体细胞，并使其能在受体细胞内复制和表达的技术。 应用： 基础理论研究中的应用 基因组测序 基因定位 基因功能研究 基因表达和调控研究 多肽类（如激素、抗生素、酶类和抗体等）产品的生产 微生物基因工程与多肽类产品的生产 转基因动物与蛋白药物的生产 转基因植物与蛋白药物的生产 转基因动物与人类器官移植 物种改良——转基因动植物、工程微生物 什么是结构分子生物学？ 结构分子生物学是研究生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。 内容：结构测定、结构运动变化规律探索、结构与功能关系 手段：X-射线衍射晶体学（蛋白质晶体学）、二维或多维核磁共振研究液相结构、电镜三维重组、电子衍射、中子衍射和各种频谱学方法。 第二份PPT分子生物学研究法 核酸：是遗传信息的携带者，是基因表达的物质基础(包括DNA与RNA) SDS裂解法：将细菌悬浮于等渗的蔗糖溶液中，用溶菌酶和EDTA处理以破坏细胞壁，去壁 细菌再用SDS裂解，从而温和地释放质粒DNA到等渗液中，然后用酚/氯仿抽提，乙醇 沉淀、洗涤质粒DNA。 荧光光度法：用EB等荧光染料示踪的核酸电泳结果可判定核酸制品的纯度。DNA分子较RNA 大得多，电泳迁移率低。 紫外分光光度法：该法主要通过A260与A280的比值来判定有无蛋白质的污染。在TE缓冲 液中，纯DNA的A260/A280为1.8，纯RNA的比值为2.0。比值升高与降低均提示不纯。 玻棒缠绕法：两个关键步骤，一是基因组DNA沉淀在细胞裂解液和乙醇的交界面；二是将 DNA沉淀缠绕在带钩玻棒上。带钩玻棒将大片段DNA从无水乙醇中转移至pH8.0的TE 缓冲液中。 压碎与浸泡法：将含待回收DNA条带的凝胶块切出，用吸头或接种针将其压碎，然后以洗脱 缓冲液浸泡，使DNA洗脱出来。 碱裂解法：在NaOH提供的高pH（12.0～12.6）条件下，用强阳离子去垢剂SDS破坏细胞壁，裂解细胞，与