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医学生物学试验
医学微生物教研室
年6月
医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座
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试验八
脓汁标本中金黄色葡萄球菌判定
医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座
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试验内容
脓汁标本中金黄色葡萄球菌判定
医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座
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目标
熟悉临床标本中常见化脓性细菌分离判定程序；掌握细菌分离培养基本技术。
医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座
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试验器材
标本：脓拭子、感染分泌物或模拟脓汁标本
菌种：金黄色葡萄球菌培养物、表皮葡萄球菌
培养基：血琼脂平板、甘露醇发酵管
其它：血浆、生理盐水、革兰染液、玻片、滴管
培养箱、酒精灯、接种环等
医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座
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检验标准
在脓汁标本中，以化脓性球菌最为常见，本实验主要检测金黄色葡萄球菌
用药前采集标本
无菌操作
医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座
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标本检测程序
脓汁、脓性分泌物（未知菌液/固体培养物）
涂片
革兰染色
镜检
血琼脂平板
接种
直接
菌落观察
血浆凝固酶试验
甘露醇发酵
诊疗汇报
医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座
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检验方法和结果汇报
直接显微镜检验：取标本直接涂片，均匀涂成菌膜，自然干燥，固定后革兰染色，油镜观察。
注：若染色后未发觉细菌，可汇报“直接镜检未发觉细菌”
革兰染色镜检
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形态排列染色性
金黄色
葡萄球菌
医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座
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医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座
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检验方法和结果汇报
细菌分离培养：取脓液或创伤分泌物接种于血琼脂平板上（接种后4℃保留），划线分离，37℃培养18~24h后，观察菌落特征，取单个菌落进行革兰染色镜检。
注：第2天观察统计结果；如培养48~72h后依然无菌生长，则汇报“无细菌生长”。
血平板培养结果观察
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菌落特点溶血性菌落颜色
金黄色
葡萄球菌
医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座
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检验方法和结果汇报
血浆凝固酶试验（玻片法）：
用灭菌接种环取标本和白葡菌（阴性对照）培养物少许，分别与玻片左右二侧生理盐水制成均匀菌悬
于玻片玻片左右二侧菌悬液中各加血浆一滴并轻轻摇匀
1~3分钟内观察结果，出现颗粒状凝集为血浆凝固酶试验阳性，不然为阴性
结果汇报：
标本+血浆白葡菌+血浆
阳性（+）/阴性（─）
医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座
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检验方法和结果汇报
甘露醇发酵试验：无菌操作取标本和白葡菌（阴性对照）培养物分别接种于甘露醇发酵管，其上覆盖无菌液体石蜡油，37℃培养18~24小时，观察结果。金葡菌发酵甘露醇产酸，使培养基变混充，颜色由紫色变黄色，是为甘露醇发酵试验阳性，而白葡菌相反。
注：第2天观察统计结果
标本+甘露醇白葡菌+甘露醇
阳性（+）/阴性（─）
医学微生物学实验脓汁
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