发酵工业灭菌方法指南.docxVIP

发酵工程制药技术

灭菌方法

灭菌是保证发酵工业生产纯种培养的关键。接种之前，培养基、空气系统、补料系统、设备及管道等都有进行严格的灭菌，并对生产环境进行消毒，以防染菌和噬菌体的污染。灭菌方法有很多种，一般可分为两大类：物理法和化学法。物理法主要有：加热灭菌、过滤除菌、射线灭菌等。化学法主要有：气体灭菌法、化学药剂灭菌等。

1、加热灭菌；原理为：菌体中蛋白质及酶在高温作用下变性、凝固、失活、从而实现杀菌。根据加热方式分为：干热灭菌和湿热灭菌。干热灭菌主要有灼烧灭菌和干热空气灭菌。

湿热灭菌主要有高压蒸汽灭菌、煮沸灭菌、巴氏消毒等。高压蒸汽灭菌：最常用的灭菌方法，一般灭菌条件为121℃、30min。煮沸灭菌法：水中煮沸15~20min，适用于一般食品和器材的灭菌。巴氏消毒法：63~66℃加热30min或71℃加热15min，适用于牛奶、啤酒、酱油等风味类食品的灭菌。

2、过滤除菌；利用过滤方法截留微生物实现除菌的方法，适用于无菌空气的获得或热敏性物料（如酶、血清、维生素、氨基酸等）的除菌。

3、射线灭菌；利用紫外线、高能电磁波或放射性物质产生的γ射线来杀灭微生物的灭菌方法，一般只适用于接种室、超净工作台、无菌培养室或物体表面的灭菌。

4、化学灭菌；利用化学药物杀死微生物的方法。根据灭菌的对象的不同有浸泡、添加、擦拭、喷洒、气态熏蒸等使用方法。常用的化学药物有石碳酸、甲醛、氯化汞、碘酒、酒精、高锰酸钾、臭氧等。

上述灭菌方法的选用需根据具体情况确定，实际灭菌操作时需要考虑发酵类型、菌株特性、无菌要求标准、培养基性质、发酵容器的特性等因素。一般而言，容器、管路及液体等常用湿热灭菌；气体及含热敏性组分的培养基常用过滤除菌的方法；环境消毒等常采用化学喷洒灭菌；有时也会根据需要结合使用。