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一、实验原理
1.提取DNA的原理
利用DNA与________、________和脂质等在物理和化学性质方面的差异,选用适当的物理或化学方法提取DNA,去除其他成分。
如:(1)DNA在酒精溶液中的溶解性:________不溶于酒精,但某些________溶于酒精。
(2)DNA在NaCl溶液中的溶解性:DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,它能溶于________的NaCl溶液。
2.鉴定DNA的原理
在一定温度下,DNA遇________________会呈现________。
二、实验步骤
三、操作提示
1.以血液为实验材料时,每100mL血液中需要加入3g柠檬酸钠,防止________。
2.加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧____________,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
四、关键点拨
1.利用动物细胞提取DNA时,破碎细胞的方法:动物细胞无细胞壁,可直接使其______。
2.不能选用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料,原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。
3.提纯DNA时,选用体积分数为95%的冷酒精的原因:体积分数为95%的冷酒精________更佳。
4.实验中进行了2次静置或离心,目的是将________和________分开,第1次操作后,DNA存在于________中;第2次操作后DNA存在于____________或________中。
例1如表关于DNA粗提取与鉴定实验的表述,不正确的是()
选项
试剂
操作
作用
A
研磨液
与生物材料混合
提取溶解DNA
B
2mol/LNaCl溶液
与提取出的DNA混合
溶解DNA
C
冷却的酒精
加入到离心后的上清液中
溶解DNA
D
二苯胺试剂
加入到溶解有DNA的NaCl溶液中
鉴定DNA
例2(2023·河北邯郸高二期中)如图为DNA的粗提取与鉴定实验的部分操作流程。下列相关叙述正确的是()
A.将图1中的研磨液过滤后保留沉淀
B.图2过程中,用玻璃棒进行交叉搅拌会使DNA析出更快
C.图2析出得到的白色丝状物只能溶于2mol/L的NaCl溶液中
D.图3对提取后的DNA进行鉴定,两支试管中均要加入二苯胺试剂
1.(2022·山东,13)关于“DNA的粗提取与鉴定”实验,下列说法错误的是()
A.过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解
B.离心研磨液是为了加速DNA的沉淀
C.在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
D.粗提取的DNA中可能含有蛋白质
2.下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是()
A.用蒸馏水使家兔的红细胞涨破,可获取富含DNA的滤液
B.DNA不溶于95%的冷酒精,但可溶于2mol/L的NaCl溶液
C.新鲜的洋葱和猪肝可作为实验材料提取DNA,而菠菜不能用于提取DNA
D.鉴定DNA时,应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中并进行沸水浴
3.下列与“DNA的粗提取与鉴定”实验相关的说法,错误的是()
A.研磨液中应加入DNA酶的抑制剂,以防细胞破碎后DNA酶降解DNA
B.研磨时需要控制好时间,以防影响DNA的提取量
C.鉴定时加入二苯胺试剂后沸水浴即可观察到较为明显的显色反应
D.鉴定时溶液蓝色的深浅与DNA含量的多少有关
4.(2023·福建福州高二期中)下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述,正确的是()
A.取材时可选用鸡血、洋葱、香蕉等富含DNA的材料进行实验
B.将白色丝状物置于2mol/L的NaCl溶液中,离心后弃去上清液
C.可将洋葱置于清水中,细胞吸水破裂后将DNA释放出来
D.鉴定DNA时,将丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液中,再加入二苯胺试剂,混匀后即呈蓝色
5.研究人员比较了不同储藏条件对棉叶DNA纯度及提取率(提取率越高,获得的DNA越多)的影响,实验结果如图所示。下列有关叙述错误的是()
A.提纯DNA时可加入75%酒精去除蛋白质等物质
B.新鲜棉叶提取的DNA纯度最高,但提取DNA的量不是最多
C.用二苯胺试剂鉴定,蓝色最深的是冷冻3d处理后提取的DNA
D.DNA不溶于酒精,在NaCl溶液中的溶解度随溶液浓度的不同而不同
6.如图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图,请据图分析,回答下列问题:
(1)上述图示中,该实验的正确操作顺序是__________________(用序号与箭头表示)。
(2)步骤④中使用2mol/LNaCl溶液的目的是_________________________________________。
(3)步骤①的目的是_______________________________________________________________,
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