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简述caty48卡秋免疫组化仪操作规程

Caty48卡秋免疫组化仪是一款在医学检验、科研等领域广泛应用的先进设备，能够高效、精准地完成免疫组化实验。以下是其详细操作规程：

准备工作

样本准备

1.组织切片

-选取合适的组织样本，按照常规方法进行固定、脱水、透明、浸蜡和包埋，制成石蜡块。使用切片机将石蜡块切成厚度为4-6μm的切片，将切片放置于涂有防脱片剂的载玻片上。

-将载玻片放入60℃烤箱中烘烤1-2小时，使切片牢固附着在载玻片上。

2.细胞涂片

-对于细胞样本，可采用离心涂片或直接涂片的方法将细胞均匀地涂抹在载玻片上。涂片后自然干燥，然后用适当的固定液（如95%乙醇）固定10-15分钟。

-固定后的涂片用PBS缓冲液冲洗3次，每次5分钟。

试剂准备

1.抗体

-根据实验目的选择合适的一抗和二抗。一抗应根据样本的来源和检测的抗原进行选择，确保其特异性和亲和力。二抗应与一抗的种属来源相匹配。

-将抗体从冰箱中取出，在室温下平衡30分钟。按照说明书的要求用抗体稀释液将抗体稀释到适当的浓度。

2.其他试剂

-准备好抗原修复液、封闭液、DAB显色液、苏木精复染液等试剂。抗原修复液可根据组织类型选择合适的类型，如柠檬酸盐缓冲液或EDTA缓冲液。封闭液一般选用5%-10%的正常血清，以减少非特异性染色。

-检查试剂的有效期和质量，确保试剂的有效性。

仪器准备

1.清洁仪器

-使用干净的湿布擦拭仪器的外部表面，去除灰尘和污渍。打开仪器的门和抽屉，检查内部是否有杂物或残留的试剂，如有需要，用蒸馏水冲洗并擦干。

2.检查耗材

-检查仪器配套的载玻片架、试剂槽、加样针等耗材是否齐全和完好。如有损坏或缺失，应及时更换。

-将载玻片架安装到仪器的相应位置，确保安装牢固。

3.开机预热

-接通仪器的电源，打开仪器的开关。仪器会自动进行自检，自检完成后，进入主界面。

-根据实验要求设置仪器的温度和湿度参数，一般温度设置为37℃，湿度设置为70%-80%。让仪器预热30分钟，使内部环境达到稳定状态。

操作流程

样本装载

1.将烘烤好的组织切片或固定好的细胞涂片放入载玻片架中，注意切片的方向和位置应一致，避免相互重叠。

2.将载玻片架小心地插入仪器的样本槽中，确保架体与仪器的卡槽紧密结合。

程序设置

1.打开仪器的操作软件，在主界面上选择“新建程序”选项。

2.根据实验步骤依次设置各个程序步骤，包括抗原修复、水化、封闭、一抗孵育、二抗孵育、显色、复染等。每个步骤需要设置相应的参数，如温度、时间、试剂种类和用量等。

-抗原修复：选择合适的抗原修复方法，如高温高压修复或微波修复。设置抗原修复液的温度和时间，一般高温高压修复的温度为121℃，时间为3-5分钟；微波修复的功率和时间根据仪器的不同进行调整。

-水化：设置水化步骤的时间和PBS缓冲液的用量，一般水化时间为5-10分钟，分3-4次进行。

-封闭：设置封闭液的种类和孵育时间，封闭液一般选用5%-10%的正常血清，孵育时间为30分钟。

-一抗孵育：设置一抗的浓度、孵育温度和时间。一抗孵育温度一般为37℃，时间为1-2小时或4℃过夜。

-二抗孵育：设置二抗的浓度、孵育温度和时间。二抗孵育温度一般为37℃，时间为30-60分钟。

-显色：设置DAB显色液的孵育时间，一般为5-10分钟，具体时间根据显色情况进行调整。

-复染：设置苏木精复染液的孵育时间，一般为1-2分钟。

3.设置完成后，保存程序并命名，以便下次使用。

试剂添加

1.根据程序设置，将相应的试剂分别加入到仪器的试剂槽中。注意试剂的添加顺序和用量应与程序设置一致。

2.添加试剂时，应使用干净的移液器或滴管，避免试剂污染。添加完成后，盖上试剂槽的盖子。

运行程序

1.在操作软件中选择已保存的程序，点击“开始”按钮，仪器将按照设置的程序自动运行。

2.在运行过程中，仪器会自动完成样本的孵育、冲洗、显色等操作。操作人员可以通过操作软件实时监控仪器的运行状态和各个步骤的执行情况。

3.如果在运行过程中出现异常情况，如试剂不足、温度异常等，仪器会自动发出警报。操作人员应及时处理异常情况，确保实验的顺利进行。

结果观察

1.程序运行结束后，从仪器中取出载玻片架。

2.将载玻片用蒸馏水冲洗干净，然后用吸水纸吸干多余的水分。

3.在载玻片上滴加适量的封片剂，盖上盖