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江西农业大学学报2025,47(4)http://xuebao.jxau.
ActaAgriculturaeUniversitatisJiangxiensis/10.3724/aauj.2025076
李菱,赵慧敏,叶德,等.橡胶草TkGASA1基因克隆、表达及亚细胞定位分析[J].江西农业大学学报,2025,47(4):890-899.
LIL,ZHAOHM,YED,etal.Cloning,expressionalcharacterizationandsubcellularlocalizationofTkGASA1geneinrubberdande⁃
lion(Taraxacumkok-saghyzRodin)[J].ActaagriculturaeuniversitatisJiangxiensis,2025,47(4):890-899.
橡胶草TkGASA1基因克隆、表达
及亚细胞定位分析
1,21,21,21,21,2*
李菱,赵慧敏,叶德,唐朝荣,刘慧
(1.海南大学热带农林学院(农业农村学院、乡村振兴学院)/天然橡胶省部共建协同创新中心,海南海口570228;
2.海南大学南繁学院(三亚南繁研究院),海南三亚572025)
摘要:【目的】橡胶草(Taraxacumkok-saghyzRodin)是最有发展潜能的产胶替代植物,但还需要了解其生长和生
殖发育调控机制以进行遗传改良。富含半胱氨酸的小肽基因GibberellicAcid-stimulatedarabidopsis(GASA)广泛
参与调控植物多种生长和生殖发育过程,克隆橡胶草GASA基因并分析其表达模式和亚细胞定位可为进一步解
析GASA基因在橡胶草生长与生殖发育中的功能提供理论参考。【方法】以橡胶草种质资源系TK20为研究材料,
利用转录组数据筛选到1个花中高表达的GASA基因,命名为TkGASA1。克隆得到TkGASA1并对其进行生物信
息学分析,并通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测TkGASA1在不同组织及不同花器官中的表达模式,再利用烟草
瞬时转染检测TkGASA1的亚细胞定位。【结果】成功克隆出TkGASA1基因的编码序列(codingsequence,CDS),其
全长为309bp,编码的TkGASA1蛋白N端有1个信号肽,中间为高度可变的亲水区,C端是富含12个半胱氨酸
残基的GASA结构域。TkGASA1为亲水性蛋白,二级结构由无规则卷曲(Randomcoil,c)和α-螺旋(Alphahelix,
h)组成,而三级结构与青蒿(Artemisiaannua)中的AaGAST1蛋白相似度较高。TkGASA1在花中检测到高表达,
花梗和叶片中检测到低表达,根和胶乳中几乎检测不到表达,在不同花器官中,TkGASA1在花柱、柱头、冠毛和
喙中均检测到较高的表达。蛋白亚细胞定位结果显示TkGASA1-GFP融合蛋白绿色荧光信号位于细胞质和细
胞核中。【结论】橡胶草TkGASA1基因编码1个含有102个氨基酸的蛋白,该蛋白具有典型的GASA结构特征,定
位在细胞质和细胞核中,TkGASA1主要在橡胶草花中高表达,且在花柱、柱头、冠毛和喙中也有较高的表达,本
研究可为进一步分析TkGASA1基因功能提供理论依据。
关键词:橡胶草;TkGASA1;生物信息学;表达分析;亚细胞定位
中图分类号:S576文献标志码:A开放科学(资源服务)标识码(OSID):
文章编号:1000-2286(2025)04-0890-10
CSTR
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