第7章微生物遗传与菌种选育新.pptVIP

（6）利用和创造形态，生理与产量间的相关指标淀粉酶变色圈试验变色圈大的为淀粉酶高产菌落第86页，共138页，星期日，2025年，2月5日在琼脂平板上，通过观察测定某突变菌落周围蛋白酶水解圈的大小、淀粉酶变色圈（用碘液使淀粉显色）的大小，氨基酸显色圈（将菌落用打孔机取下，转移到滤纸上，再用茚三酮试剂显色）的大小，柠檬酸变色圈（可在厚滤纸上培养，用溴甲酚绿作指示剂）的大小，抗生素抑制圈的大小，指示菌生长圈的大小（测定生长因子产生），纤维素酶对纤维素水解圈（用刚果红染色）的大小，外毒素的沉淀反应圈的大小等，均可为初筛工作中估计某突变株代谢产物量的“形态”指标。第87页，共138页，星期日，2025年，2月5日（7）设计或采用高效筛选方案或方法设计简便、高效的科学筛选方案。初筛筛选工作复筛以量为主（选留较多有生产潜力的菌株）以质为主（对少量潜力大的菌株的代谢产物量作精确测定）第88页，共138页，星期日，2025年，2月5日一个出发菌株诱变剂处理选出200个单孢子菌菌株初筛（每株1瓶）选出50株复筛（每株4瓶）选出5株第一轮第二轮五个出发菌株初筛（每株1瓶）选出50株复筛（每株4瓶）选出5株40株40株40株40株40株诱变剂处理第89页，共138页，星期日，2025年，2月5日初筛复筛对产量突变株生产性能的测定方法粗测为主在培养皿平板上在摇瓶中（8）创造新型筛选方法较精确的测定摇瓶培养or台式自控发酵罐培养第90页，共138页，星期日，2025年，2月5日3.突变株的筛选方法(p212）高产突变菌株的筛选方法抗性突变体的筛选方法营养缺陷型的的筛选方法与突变株的筛选相关的几个概念第91页，共138页，星期日，2025年，2月5日（1）产量突变株的筛选1971年，国外有人报道了筛选春日霉素（kasugamycin，即“春雷霉素”）生产菌时所采用的一种琼脂块培养法，一年内曾使该抗生素产量提高10倍。第92页，共138页，星期日，2025年，2月5日此法的关键是用打孔器取出含有一个小菌落的琼脂块作分别培养。这样，各琼脂块所含养料和接触空气面积基本相同，且产生的抗生素等代谢产物不致扩散出琼脂块外。数据精确，效率高第93页，共138页，星期日，2025年，2月5日（2）抗药性突变株的筛选基因突变使菌株对某种或某几种药物，特别是抗生素，产生抗性。特点：正选择标记（突变株可直接从抗性平板上获得-----在加有相应抗生素的平板上，只有抗性突变能生长。所以很容易分离得到。）第94页，共138页，星期日，2025年，2月5日梯度平板法（gradientplate）是定向筛选抗药性突变株的一种有效方法，通过制备琼脂表面存在药物浓度梯度的平板、在其上涂布诱变处理后的细胞悬液、经培养后再从其上选取抗药性菌落等步骤，就可定向筛选到相应抗药性突变株。第95页，共138页，星期日，2025年，2月5日梯度平板法（gradientplate）是定向筛选抗药性突变株的一种有效方法。第96页，共138页，星期日，2025年，2月5日表示方法：所抗药物的前三个小写斜体英文字母加上“r”。strrstrs对链霉素的抗性敏感性第97页，共138页，星期日，2025年，2月5日（3）营养缺陷型突变株的筛选营养缺陷型突变株（auxotrophicmutant）在生物学基础理论和应用研究以及生产实践上都有极其重要的意义。第98页，共138页，星期日，2025年，2月5日营养缺陷型的表示方法：基因型：所需营养物的前三个英文小写斜体字母表示：hisC（组氨酸缺陷型，其中的大写字母C同一表型中不同基因的突变）表型：同上，但第一个字母大写，且不用斜体：HisC在具体使用时多用hisC-和hisC+，分别表示缺陷型和野生型。第99页，共138页，星期日，2025年，2月5日5.抗原突变型（antigenicmutant）指由于基因突变引起的细胞抗原结构发生的变异类型，一般也属非选择性突变。例如，细胞壁缺陷变异（L型细菌等）、荚膜或鞭毛成分变异等。第54页，共138页，星期日，2025年，2月5日6.产量突变型（metabolitequantitativemutant）通过基因突变而产生的在代谢产物产量上明显有别于原始菌株的突变株，称为产量突变型。“正变株”（plus-mutant）产量高于原始菌株“负变株”（minus-mutant