病毒感染对免疫系统的影响.pptVIP

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①分离病毒对诊治病人有指导性意义,尤其病程较长者;②发现第1例新的病毒或对已被消灭的病毒性疾病(如天花)怀疑“死灰复燃”时;③为鉴别临床上具有相同症状的疾病,以明确何种病毒感染;④监测所用的病毒活疫苗,及时发现回复毒力的变异株等第30页,共62页,星期日,2025年,2月5日在流感病毒的分离培养中最,敏感的而而特异的是鸡胚接种,,并用血凝和血凝抑制试验以确定病毒。此外,细胞培养也可应用,接种动物分离培养的方法目前很少应用,但狂犬病毒及乙型脑炎病毒的分离与鉴定中还需应用动物接种,并结合用特异抗体作中和试验或作免疫荧光染色以鉴定病毒种类第31页,共62页,星期日,2025年,2月5日(三)检查病毒性抗原及抗体的方法1检测抗原:近年来,采用标记技术,即用荧光素、放射性同位素、过氧化物酶特异标记的抗体,检测标本中相应的抗原,如检测病毒感染局部脱落细胞或分泌物细胞中的抗原,也可用酶联免疫测定法或免疫测定ELISA或乳胶凝集法检测抗原。此方法具有敏感、特异、快速等优点。第32页,共62页,星期日,2025年,2月5日2检测抗体:用病毒特异性抗原可以检测感染者血清中的IgM,检测病毒特异性IgM抗体可诊断急性感染,特别是IgM抗体的存在对证实孕妇感染风疹病毒尤为重。另外,检测早期抗体可以快速诊断病原体利用特异抗原检测IgG类抗体,则需早期和恢复期双份血清,且抗体效价4倍以上增高方有诊断意义。此外,分子生物学检测技术、气相色谱技术等,均可用来分析和鉴定病毒感染第33页,共62页,星期日,2025年,2月5日四检测病毒的核酸的方法利用病毒基因作为探针用核酸杂交的方法检测标本中有无相应的病毒核酸,进行疾病的诊断第34页,共62页,星期日,2025年,2月5日1核酸杂交技术双链DNA在高温及碱性溶液中,碱基对间的氢键被破坏,两链分开变成单链的过程叫变性;在中性盐溶液中,当温度慢慢冷却至室温时单链DNA又重新组合成双链的过程叫复性。核酸分子杂交技术的原理就是利用DNA可以变性、复性的特性,制成用同位素或非同位素标记的单链DNA片段基因探针与固定在硝酸纤维素膜上待测的变性DNA杂交,再用放射自显影技术或其他显色法来确定与探针DNA同源的DNA第35页,共62页,星期日,2025年,2月5日核酸杂交技术不仅具有特异、敏感和快速等优点,而且能定量与分型。如斑点核酸杂交细胞内原位杂交、DNA印迹杂、RNA印迹杂交等第36页,共62页,星期日,2025年,2月5日2核酸扩增法80年代中期,美国Cetus公司首创一种DNA扩增技术-PCR,这一技术能使pg水平的核酸在短时间内达到ng水平而被检出。近年来还发展了一系列以PCR为基础的其他体外核酸扩增技术。已被广泛应用于病毒性感染的诊断与研究中第37页,共62页,星期日,2025年,2月5日对以测定基因核酸序列的病毒,可设计相应的病毒基因的引物,作多聚酶链反应(PCR),其原则为先加入标本中提取的核酸,对RNA则需先转录成DNA,加入耐热的DNA多聚酶后,在一定温度及条件下作PCR。通过扩增病毒基因片段可诊断标本中是否存在病毒核酸。但需注意操作污染而出现的假阳性检测病毒核酸的缺点是:核酸阳性不等于标本中有活病毒,不能检测不了解核酸序列的病毒第38页,共62页,星期日,2025年,2月5日第二节抗病毒治疗病毒感机体引起疾病是病毒与机体相互作用的结果.因此,抗病毒治疗应采取既针对病毒又针对机体的综合措施,即一方面选用抑制病毒复制的药物或制剂,另一方面需采用提高机体免疫应答,促进消灭病毒感染细胞第39页,共62页,星期日,2025年,2月5日一、抗病毒药物或制剂病毒为严格细胞内寄生性微生物,所以,抗病毒药物必须对病毒有选择性抑制作用而又不损伤宿主细胞或机体。而且,一种理想的药物应是在控制临床症状同时不影响机体对病毒产生免疫应答。从理论上讲,病毒复制的任何一个环节都可以是抗病毒药物发挥作用的靶位置,但是要区别病毒复制与宿主细胞的正常生理过程确实是很困难的第40页,共62页,星期日,2025年,2月5日尽管近年来随着分子病毒学发展而研制出许多抗病毒新药,但是,大多数抗病毒药物的应用都有一定的

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