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八角茴香中黄曲霉毒素B₁的快速测定
1范围
本文件描述了八角茴香中黄曲霉毒素B的快速检测方法。1
本文件适用于八角茴香中黄曲霉毒素B的快速定性测定。1
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB5009.22-2016食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
八角staranise
中国药典2020年版名称为八角茴香(AnisiStellatiFructus)),为木兰科植物八角茴香(Illicium
verumHook.f.)的干燥成熟果实,亦称八角茴香、大茴香等,原产于我国,主要分布于广西、云南、
广东等省区,越南、泰国等东盟国家也有种植。
4原理
本方法采用竞争抑制免疫层析原理,样品中的黄曲霉毒素B经提取与胶体金标记的特异性抗体结合,1
抑制了抗体和试纸条中检测线(T线)上抗原的结合,从而导致检测线(T线)颜色深浅的变化。通过检测
线(T线)与控制线(C线)颜色深浅比较,对样品中黄曲霉毒素B进行定性判定。1
5试剂和材料
5.1试剂
5.1.1除另有说明外,本方法所用试剂均为分析纯,实验用水符合GB/T6682中三级水的要求。
5.1.2乙腈
5.2标准品
黄曲霉毒素B标准物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1,纯度≥98.6%。1
表1黄曲霉毒素B中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量1
中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子质量
黄曲霉毒素BAflatoxinB1162-65-8CHO312.27
1117126
5.3标准溶液的配制
5.3.1黄曲霉毒素B的标准储备液(100μg/mL):称取5mg(精确至0.0001g)黄曲霉毒素B11
标准物质参考(5.2),置于50mL容量瓶中,用乙腈溶解并定容至刻度;或采用经国家认证并授予标
准物质证书的标准溶液。
1
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5.3.2黄曲霉毒素B的标准工作液(2μg/mL):精密量取黄曲霉毒素B标准储备液(100μg/mL)11
1mL于50mL容量瓶,用乙腈定容至刻度。
5.4材料
可选用黄曲霉毒素B快速检测试剂盒(含试纸条、微孔试剂、样品稀释液、说明书),需在室温、1
密封、干燥、避光保存。
6仪器设备
6.1电子天平:感量为0.0001g
6.2移液器:量程1mL、10mL
7分析步骤
7.1试样制备
7.1.1将待检的八角样品均匀粉碎,过20目筛网,称取5.0g±0.05g样本于50mL离心管中,加入
10mL乙腈,振荡3min,于离心机中4000r/min离心5min,制成待测液备用。
7.1.2取500μL上清液在60℃下氮气吹干,取1mL样本稀释液复溶后,于离心机中4000r/min
离心3min,制成待测液备有。
7.2测定步骤
7.2.1取200μL待测液到微孔试剂中,缓慢抽吸至检测样本与微孔试剂混匀大约5~6次,孵育3min。
7.2.2将标记好的试纸条使印有LOGO手柄端向上,另一端向下浸入溶液中,反应5min,判读结果。
7.2.3每批样品应同时进行空白试验,将待测液用水代替,按照7.2.1和7.2.2与样品同
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