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课时分层作业(五十二)基因工程的基本工
具和基本操作程序
1.(2025·广东茂名模拟)用PCR检测某转基因植株是否导入目的基因时,电泳
鉴定时发现扩增出多条条带,其原因最可能是()
A.引物长度过短
B.引物之间发生配对
C.体系中Mg2+浓度过低
D.电泳时凝胶浓度过高
A[引物长度过短可能会导致特异性降低,从而结合到非目的基因的区域进行
扩增,出现多条条带,A正确;如果引物之间发生配对,则引物与模板DNA结
合比例降低,从而影响PCR反应的效率,B错误;体系中Mg2+浓度过低会影
响DNA聚合酶的活性,可能导致扩增效率降低甚至扩增失败,C错误;电泳时
凝胶浓度过高主要影响的是DNA条带的迁移速度,而不是导致出现多条条带的
原因,D错误。]
2.OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶,研究人
员将这些基因分别与叶绿体转运肽(引导合成的蛋白质进入叶绿体)基因连接,构
建多基因表达载体(载体中部分序列如下图所示),利用农杆菌转化法转化水稻,
在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径,提高了水稻的产量。下列叙述错误的
是()
A.四个基因转录时不是都以DNA的同一条单链为模板
B.四个基因都在水稻叶绿体内进行转录翻译
C.应选用含潮霉素的培养基可筛选被农杆菌转化的水稻细胞
D.可用抗原—抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达情况
B[基因的启动子方向有不同,说明转录时不是都以DNA的同一条单链为模板,
A正确;这些基因在叶绿体外合成蛋白质,由叶绿体转运肽引导合成的蛋白质进
入叶绿体,B错误;卡那霉素抗性基因不在T-DNA上,应选用潮霉素培养基筛
选被农杆菌转化的水稻细胞,C正确;用抗原—抗体杂交技术检测是否有相应的
蛋白质产生,从而检测四种酶在转基因水稻中的表达情况,D正确。]
3.温和噬菌体侵染细菌后,将其基因组整合到细菌的基因组中,当细菌分裂产
生子代细菌时,其子代DNA中都带有整合的噬菌体基因组,这会使细菌不会因
噬菌体感染而裂解,此现象称为细菌的溶源化。下列说法错误的是()
A.细菌溶源化过程中发生了基因重组
B.温和噬菌体可以用作基因工程的载体
C.子代细菌中噬菌体基因的遗传遵循分离定律
D.可通过检测子代细菌的DNA探究是否发生溶源化现象
C[细菌溶源化过程中发生了噬菌体基因和细菌基因的重组,A正确;温和噬
菌体可以将遗传物质注入细菌,并且将遗传物质整合到细菌细胞内,所以可以
作为基因工程的载体,B正确;分离定律适用于进行有性生殖的真核生物的细胞
核遗传,子代细菌中噬菌体基因的遗传不遵循分离定律,C错误;发生溶源化的
细菌细胞内含有噬菌体和细菌的遗传物质,所以通过检测子代细菌DNA可以证
明是否发生溶源化现象,D正确。]
4.PCR引物的3′端为结合模板DNA的关键碱基,5′端无严格限制,可用于
添加限制酶切点等序列。下列叙述正确的是()
A.该图表示PCR循环中的变性环节
B.引物的长度、引物中碱基的比例以及反应体系中引物的浓度都与扩增产物的
特异性相关
C.脱氧核苷酸作为扩增的原料会依次连接到5′端
D.用图中引物扩增两个循环后可获得目的产物
B[该图表示PCR循环中的复性环节,A错误;引物的长度、引物中碱基的比
例以及反应体系中引物的浓度都与扩增产物的特异性相关,B正确;脱氧核苷酸
作为扩增的原料会依次连接到3′端,C错误;用图中引物扩增至少三个循环后
可获得目的产物,D错误。]
5.(2025·广东珠海模拟)两个核酸片段在适宜条件下,经过X酶的催化作用,发
生下图变化。下列相关叙述正确的是()
A.X酶是DNA聚合酶
B.X酶可以从大肠杆菌中分离得到
C.X酶能催化氢键的形成
D.X酶催化游离的核苷酸合成DNA单链
B[分析题图可知,X酶能将DNA片段连接起来,是DNA连接酶,A错误;
分析题图可知,X酶是DNA连接酶,能连接黏性末端,可以从大肠杆菌中分离
得到,B正确;X酶是DNA连接酶,能催化磷酸二酯键的形成,C错误;X酶
是DNA连接酶,催化游离的核苷酸合成DNA单链的酶为DNA聚合酶,D错
误。]
6.采用CTAB法可获得高纯度的DNA,CTAB是阳离子去污剂,可溶解细胞
膜,与核酸形成复
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