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(1)胚珠培养的意义:防止杂种胚早期败育,获得杂种植株;也为拯救心型期胚或心型期以前的胚胎提供了新的途径。授粉前胚珠培养,可作为试管受精的基础;未授粉胚珠培养,能培养获得单倍体植株,用于单倍体育种。第31页,共59页,星期日,2025年,2月5日(2)胚珠培养方法: A、材料的选择和灭菌: 未授粉胚珠:开花前1-6天, 授粉胚珠:授粉后1-120天不等,较晚时期有利于胚的发育。 灭菌:先对子房或外表组织消毒灭菌后,后取出胚珠培养。 辣椒子房第32页,共59页,星期日,2025年,2月5日 B、培养基多用Nitsch、White、MS等基本培养基 植物激素:细胞分裂素对授粉胚珠发育常有促进作用。 有机物:添加有机附加物(椰汁,水解酪蛋白)可以促进授粉胚珠的发育。 蔗糖浓度:4-10%。第33页,共59页,星期日,2025年,2月5日 (3)胎座和子房对胚珠培养的影响:带有胎座或子房组织的胚珠相对较易培养。 (4)胚发育时期的影响:一般来说,合子或早期原胚期的胚珠较难剖取和培养,对培养基的成分要求也较严格。C、培养:子房培养一般温度为20~25℃。对光照要求不严,大多数植物子房培养早期在黑暗,弱光照条件下生长良好。第34页,共59页,星期日,2025年,2月5日8.2.2、子房培养: 包括授粉子房和未授粉子房培养。 1949年和1951年最早在黄瓜、番茄、菜豆、草莓、烟草等植物上获得成功。 授粉子房培养形成成熟果实和种子; 未授粉子房培养形成小的无籽果实。 授粉后3d的玉米子房,其中6颗发育成种子,其余产生愈伤组织。第35页,共59页,星期日,2025年,2月5日(1)子房培养的意义:获得杂种植株;未授粉子房培养为试管受精提供技术基础;未授粉子房培养能获得获得单倍体植株,用于单倍体育种。百合子房第36页,共59页,星期日,2025年,2月5日(2)子房培养的一般方法材料制备:未传粉子房培养时,选用开花前1~5d的花蕾。培养基:子房培养常用的培养基有MS、Whiter、Nitsch等。碳源主要是蔗糖和葡萄糖,浓度为2~5%。B族维生素、椰子乳和其它一些天然提取物对子房发育成果实或种子都有良好的促进作用。培养基中附加一定的赤霉素,生长素和细胞分裂素,可使离体子房发育的果实增大。培养:子房培养一般温度为20~25℃。对光照要求不严,大多数植物子房培养早期在黑暗,弱光照条件下生长良好。第37页,共59页,星期日,2025年,2月5日(3)附属花器对子房培养的作用花被在果实和胚胎发育中成起着重要的作用。双子叶植物各种花的萼片,对培养子房的生长显示了有利的影响。(4)胚囊的发育时期对子房培养的作用从研究较多的大麦和水稻来看,在胚囊发育的各个时期都可以诱导,而以接近成熟的胚囊易于诱导成功。第38页,共59页,星期日,2025年,2月5日两种途径:直接成苗的发育途径:在离体培养条件下,合子胚在胚珠内继续发育至成熟,最终成熟胚在胚珠内萌发,形成小植株;脱分化和再分化途径:离体子房或胚珠内的幼胚等组织脱分化,产生愈伤组织,经诱导后,愈伤组织形成体细胞胚或经器官发生,再形成小植株。8.2.3离体子房和胚珠的发育第39页,共59页,星期日,2025年,2月5日Fig1?
MorphologicalaspectsofsomaticembryogenesisinovarycultureofCocosnuciferaL.aCallusderivedfromovaryexplantsafter10weeksofcultureinitiation(bar=4?mm).bEmbryogenicstructures(Es)developedfromcalliaftersub-culturingintosomaticembryoinductionmedium(bar=5?mm).cDevelopingshootsingerminationmedium.dAcompleteplantletwithroots(Rt)椰子的子房培养第40页,共59页,星期日,2025年,2月5日通过雌配子体的离体培养,可以诱导胚囊细胞发育成单倍体胚。把这种通过未授粉胚珠或子房的离体培养进行单倍体胚胎发育的过程叫雌核发育(gynogenesis)。目前已有包括甜菜、小麦、水稻、烟草和玉米等多种农作物可以通过雌核发育途径产生单倍体。8
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