组织学与胚胎学绪.pptVIP

⑵基本过程①抗原提取与抗体制备：用特殊方法分离、纯化人或动物组织的某种蛋白质（如细胞膜抗原）作为抗原。将抗原注入另一种动物体内，其体内会产生针对该抗原的抗体（免疫球蛋白）,再从动物血清中提取该抗体，并用荧光素、辣根过氧化物酶或胶体金标记，成为标记抗体。②标记抗体与抗原结合：用可呈色的标记抗体与组织切片或细胞浮育，抗体则与相应的特异性抗原结合。在显微镜下观察抗体的标记物就知道某种肽或蛋白质的分布部位。第30页，共53页，星期日，2025年，2月5日图10免疫组织化学原理模式图第31页，共53页，星期日，2025年，2月5日⑶呈色情况与观察：①常用的荧光素是异硫氰酸荧光素发出黄绿色荧光，四甲基异硫氰酸罗丹明发出橙红色荧光。(见图1—4)第32页，共53页，星期日，2025年，2月5日②辣根过氧化物酶（horseradishperoxidase，HRP）,它的底物是3，3′-二氨基联苯胺（DAB）和H2O2。HRP能使DAB氧化形成棕黄色产物。第33页，共53页，星期日，2025年，2月5日③胶体金标记多用于电镜观察。胶体金标记辣根过氧化物酶标记第34页，共53页，星期日，2025年，2月5日3.原位杂交术（insituhybridization）原位杂交术，又称核酸分子杂交组织化学术，它是通过检测细胞内mRNA和DNA序列片段，原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。⑴基本原理及步骤：①制备带有标记物的已知碱基顺序的核酸(DNA或RNA片断)探针。②将探针与组织或细胞共同浮育，使探针与组织细胞中互补核酸单链结合，即分子杂交。③通过标记物的显示，在光镜或电镜下观察、分析待测DNA序列或RNA的有无及相对量。第35页，共53页，星期日，2025年，2月5日第36页，共53页，星期日，2025年，2月5日⑵常用的探针标记物：①放射性核素，如35S，32P，3H(氚)等，经放射自显影技术处理后观察。②地高辛，经免疫组织化学处理后观察。图：原位杂交(地高辛标记)大鼠主动脉平滑肌细胞表达弹性蛋白mRNA，胞质呈综黄色。第37页，共53页，星期日，2025年，2月5日⑶核酸探针的制备：应用DNA合成仪合成寡聚核苷酸探针。DNA合成仪(美国PE8909型)用于合成DNA第38页，共53页，星期日，2025年，2月5日第1页，共53页，星期日，2025年，2月5日第1章组织学绪论(introduction)一、组织学的内容和意义何谓组织学？组织学是研究机体的细胞、组织、器官的微细结构及其相关功能的科学。如研究肺的微细结构与其行使呼吸功能的关系，肾的微细结构与其产生尿液的关系等。与解剖学比较，解剖学主要是用解剖的方法在系统和器官水平上研究机体的大体结构，而组织学则是利用显微镜等手段，在组织、细胞、亚细胞和分子水平上对机体进行研究，所以组织学又称为显微解剖学。第2页，共53页，星期日，2025年，2月5日何谓组织（tissue）、器官和系统？①由细胞群和细胞外基质共同组成的结构称为组织。细胞是机体结构和功能的基本单位，细胞外基质由细胞产生，位于细胞之间，又称细胞间质。人体有四种基本组织上皮组织结缔组织肌肉组织神经组织②由四大基本组织以不同的种类、数量和方式组合在一起形成器官。③由若干个功能相关的器官构成一个系统。第3页，共53页，星期日，2025年，2月5日学习组织学有何意义？①结构决定了功能，学习组织学是为学习生理学打基础。②正常的组织结构是异常的病理改变的对照标本，只有掌握了“正常”，才能识别“异常”，所以学习组织学也是为学习病理学打基础。正常肾皮质急性渗出性肾小球肾炎第4页，共53页，星期日，2025年，2月5日③促进人类了解自身的微观世界。④掌握组织学的基本知识和技能（用显微镜观察标本的能力），为将来从事组织病理学方面的研究工作奠定基础。二、组织学发展简史和当代组织学（自学）三、组织学的学习方法1.抓住特征性结构，由浅入深地剖析机体各系统的主要器官，由于它们的功能不同，组织结构不一样。例如肺行使呼吸功能，其特征性结构是一系列的导气管道和肺泡。第5页，共