受体放射分析.pptVIP

第七章受体放射分析〔RBA〕;;虽然受体在总蛋白分子中所占的份额很小，约为十万到百万分之一，但受体的功能却十分重要，它接受细胞外的特定信号〔神经递质、激素、某些药物等〕，通过受体后特定的信号传递系统，引起细胞的特定反响，因此，受体是高等动物适应环境、协调机体各种细胞功能的关键分子。可以认为，受体是细胞适应内外环境最重要的门户，在中枢神经系统中更是信息传递和储存的枢纽。;一、受体的分类和受体亚型

按受体所在的部位不同分为细胞膜受体和细胞核受体。每种受体都有特异的内源性和外源性配基，但是药理实验和放射配基结合实验发现，不少受体存在两种或两种以上的亚型。所谓受体的亚型是指受体分子结构上既有局部相同之处，也存在局部差异，它们对一定的配基有不同的亲和力，在生物学上具有各自不同的效应。受体亚型的区分是生物进化的结果，有利于机体处理信息的能力及适应性更强。;二、跨膜受体的信号传递通路

跨膜受体是含糖或不含糖的蛋白质分子，它的主要作用是将细胞外的信号传导到细胞内，信号再从细胞浆传递到效应器，最后是一个特定的生物学效应。信号的这种传导过程称为信号传导通路〔signaltransudationpathway〕，它是当今生物学领域中一个重大的研究课题。受体信号传导确实切通路和机理至今仍未完全说明，同学们可参阅“细胞生物学〞等相关课程。;三、受体与配基结合的特性;;4、与效应的一致性

受体的主要功能是介导配基的生物效应，如果一种蛋白能与某种物质结合而不介导特定的生物效应，那么这种蛋白不能称之为受体。所以用生物效应作为观察受体和配基性质的标准是十分必要的。从配基的角度分析，有的是阳性效应，有的是阴性效应。阳性效应就是配基与受体结合后引起阳性生理效应，称为冲动剂。阴性效应就是配基与受体结合后不但不引起阳性生理效应，而且阻断内源性配基的阳性生理作用，称为拮抗剂或阻断剂。;四、受体的生理调节;;第二节受体配基结合反响的根本原理;〔二〕复合物的浓度和配基浓度的关系：上式展开，重排，得到下式：;曲线的???度主要反映受体的数量多少，曲线上升的快慢那么主要反映受体和配基的亲和力〔亲和力越高，上升越快〕。;〔三〕非特异结合〔non－specificbinding，NSB〕上述饱和曲线是受体与配基的特异结合形成的。这种结合的特点是低容量〔受体的数量不多〕和高亲和力，所以容易饱和。但是，任何受体标本除特异结合外，还会有一局部非特异结合，当别离特异结合的复合物测量放射性时，这局部非特异结合的放射性混在一起，测到的是总放射性〔totalbinding，TB〕，必需先减去非特异结合〔NSB〕，才能得到特异结合〔specificbinding，SB〕的放射性。;NSB主要来自杂蛋白，反响器壁，别离材料的吸附，它的特点是，容量很大，而亲和力低，因此在一般情况下不被饱和，也就是随着配基浓度的升高，它不呈饱和曲线，而是一条上升的直线〔图9－l〕。另外，如果系统中存在大量同种受体的非标记配基，那么放射性的SB被非标记配基取代，而NSB由于容量很大，空余的位点很多，放射性不被取代。所以要从TB中减去NSB，最根本的方法是做一系列平行管，所有的条件都与TB管相同，只是多加100-1000倍量的非标记配基，将SB完全取代掉，这时的放射性结合即为NSB。由于NSB和放射配基呈直线关系，多点饱和法的实验中往往只需做3-4点，再用直线回归法求出其余各点的放射性。;〔四〕Scatchard作图〔Scatchardplot〕

将9－1写成以下形式：KD＝[RT－RL］[L]／「RL]上式重排，得到著名的Scatchard函数：;Scatchard作图除进行数据处理外，还能判断一些较复杂的情况。例如，一般来说，Scatchard作图在以下情况下不呈直线：①双位点或多位点系统，亦即受体有两种以上亲和力；②受体有正协同〔nositivecooperatively〕或负协同〔negativecooperatively〕现象；③非特异结合的测定所用非标记配基浓度不对，或把一局部非特异结合也抑制了，或对特异结合的抑制不完全。;〔五〕正负协同作用;〔六〕受体与配基反响的动力学〔kinetics〕;〔七〕竞争性取代反响〔competitivedisplacementreaction)

在一个受体和放射配基的反响系统中参加另一个化合物，它假设能和受体的配基结合位点结合，那么会与放射配基竞争与受体结合，最终将表现为放射配基与受体形成复合物的能力降低〔亲和力降低〕，但受体数量不变所以叫竞争性取代反响，此