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·440·JClinTransfusLabMed,August.2024,Vol26,No.4

•论著•

岩藻糖基转移酶1敲除的DAMI细胞系的N-糖基化组学分析*

朱慧君陆萍

上海市血液中心，上海200051

DOI：10.3969/j.issn.1671-2587.2024.04.002

*本课题受国家自然科学基金青年项目（No.、上海市卫生健康委员会卫生行业临床研究专项（No.202140060）资助

作者简介：朱慧君，主要从事血小板免疫血液学研究，（E-mail）zhuhuijun@。

通信作者：陆萍，主要从事血小板免疫血液学研究，（E-mail）luping@。

摘要

【】目的糖蛋白对血小板的功能至关重要，最近发现组织血型抗原Lewisy在血小板中有表达。由于血小板无

核，不能直接操纵其基因，我们在先前的研究中构建了岩藻糖基转移酶1（FUT1）敲除的人巨核细胞白血病细胞DAMI细胞

系。通过对FUT1敲除的DAMI细胞系进行全范围的N-糖基化组学分析以研究FUT1对DAMI中糖蛋白表达及功能的影响，为

研究其在血小板中的功能提供思路和Lewisy修饰的候选蛋白。方法FUT1敲除的DAMI细胞和野生型DAMI细胞各三个复

样，提取蛋白质并消化成肽段，使用混合凝集素富集后用N-糖酰胺酶F处理切除糖蛋白上的糖链，随后进行高效液相色谱-质

谱分析。对所得结果进行亚定位分析、基因功能分析和KEGG通路分析。最后，对FUT1敲除及野生型DAMI细胞进行静态和

流动粘附实验，以验证前述分析中差异化糖肽富集的功能。结果在FUT1敲除和野生型DAMI细胞中共鉴定到1110个N连

接的糖基化位点、792个N-糖肽，以及592个糖蛋白。相比于野生型DAMI细胞，FUT1敲除细胞中有59个N-糖肽的表达量有

‒

显著变化，其中20个显著下调（log2（倍数变化）＜1）而39个显著上调（log2（倍数变化）＞1）。对结果的生物信息学分

析显示FUT1敲除显著影响的这些糖肽主要包含在粘附相关的通路和生物学过程。粘附实验显示FUT1敲除的DAMI细胞粘附

能力显著低于野生型细胞。结论N-糖基化组学分析揭示FUT1对DAMI细胞的粘附功能有影响，为后续在血小板中功能的

研究提供思路。

关键词

【】岩藻糖基转移酶血小板功能N-糖基化组学细胞粘附

中图分类号R446文献标识码A文章编号1671-2587（2024）04-0440-07

【】【】【】

N-GlycoproteomicAnalysisofFUT1KnockoutDAMICellLinesZHUHuijun,LUPing.ShanghaiBloodCenter,Shanghai

200051

AbstractObjectiveGlycoproteinsarecriticalinplateletphysiology.Inarecentstudy,histo-bloodgroupLewis

【