第五章致病微生物检验.pptVIP

反应序号A3：补做ONPGONPG+为大肠埃希氏菌，ONPG-为沙门氏菌。同时，沙门氏菌应为赖氨酸+，但甲型副伤寒沙门氏菌为赖氨酸-。ONPG:邻硝基酚β－D－半乳糖苷结果：呈现黄色为阳性反应，通常20-30min内显色注意：为提高阳性反应速度，?需大量接种培养物。过酸出现假阴性，过碱则出现假阳性。第62页，共124页，星期日，2025年，2月5日各生化群鉴定（必要时进行）第63页，共124页，星期日，2025年，2月5日商业生化鉴定在进行了初步生化鉴定的基础上，将营养琼脂上的菌落用无菌生理盐水稀释，然后，接种至API20E或VITEKAMS，进行生化鉴定。第64页，共124页，星期日，2025年，2月5日第65页，共124页，星期日，2025年，2月5日第66页，共124页，星期日，2025年，2月5日第67页，共124页，星期日，2025年，2月5日VitekAMS原理根据慨率最大似然模型法通过计算机控制阅读器每小时对温室中的测试卡自动测试一次，进行光学扫描检验并转为电信号，每个测试卡包括30项生化试验。当反应结束后，计算机将最终的结果与数据库中标准菌进行比较，从而；鉴定出结果。第68页，共124页，星期日，2025年，2月5日全自动微生物鉴定系统第69页，共124页，星期日，2025年，2月5日配制溶液第70页，共124页，星期日，2025年，2月5日扫描卡片条码第71页，共124页，星期日，2025年，2月5日卡片载入卡片底盘第72页，共124页，星期日，2025年，2月5日真空填充接种卡片?????????????第73页，共124页，星期日，2025年，2月5日卡片载入仪器第74页，共124页，星期日，2025年，2月5日取出用过的卡片第75页，共124页，星期日，2025年，2月5日

?鞭毛抗原（H）菌体抗原（O）K或Vi抗原第76页，共124页，星期日，2025年，2月5日血清学分型鉴定－－抗原的准备一般采用1.5%琼脂斜面培养物作为玻片凝集试验用的抗原。O血清不凝集时，将菌株接种在琼脂量较高的(如2.5%一3%)培养基上再检查；如果是由于Vi抗原的存在而阻止了O凝集反应时，可挑取菌苔于1mL生理盐水中做成浓菌液，于酒精灯火焰上煮沸后再检查。H抗原发育不良时，将菌株接种在0.7%～0.8%半固体琼脂平板的中央，候菌落蔓延生长时，在其边缘部分取菌检查。第77页，共124页，星期日，2025年，2月5日抗原抗体反应的特点特异性按比例可逆性第78页，共124页，星期日，2025年，2月5日血清学分型鉴定－－O抗原的鉴定用A～F多价O血清做玻片凝集试验，同时用生理盐水做对照。在生理盐水中自凝者为粗糙形菌株，不能分型。被A～F多价O血清凝集者，依次用其他因子血清做凝集试验。根据试验结果，判定O群。不被A～F多价O血清凝集者，先用57种或163种沙门氏菌因子血清中的9种多价O血清检查，如有其中一种血清凝集，则用这种血清所包括的O群血清逐一检查，以确定O群。第79页，共124页，星期日，2025年，2月5日血清学分型鉴定H抗原的鉴定属于A～F各O群的常见菌型，依次用H因子血清检查H抗原。Vi抗原的鉴定

用Vi因子血清检查。已知具有Vi抗原的菌型有：伤寒沙门氏菌，丙型副伤寒沙门氏菌，都柏林沙门氏菌。第80页，共124页，星期日，2025年，2月5日第81页，共124页，星期日，2025年，2月5日第82页，共124页，星期日，2025年，2月5日第83页，共124页，星期日，2025年，2月5日菌型的判定和结果报告综合以上生化试验和血清学分型鉴定的结果，按照有关沙门氏菌属抗原表判定菌型，并报告25克检样中检出或未检出沙门氏菌属。第84页，共124页，星期日，2025年，2月5日GB

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沙门氏菌噬菌体诊断检验第85页，共124页，星期日，2025年，2月5日沙门氏菌检测1-2Test是Biocontrol公司的专利产品，被全世界的客户广泛采纳，专门用来检测沙门氏菌。它利用免疫扩散原理，将科学和实际应用，结果的可靠性和容易使用结合在一块。每个试剂都是独立包装，包含实验所需要的所有试剂。实验结果肉眼可见，不需要配备仪器。第86页，共124页，星期日，2025年，2月5日2B加1mL未增菌混合物于9mL碘激活的TBG培养液中，在42±0.5℃水浴培养6-8h。1B参考新版细菌学分析手册（BAM）准备样品。35-37℃培养24±2h。第87页，共124页，星期日，2025年，2月5日沙门