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《流式细胞术检测组织样本中血液肿瘤细胞的中国专家共识》解读

血液肿瘤，如淋巴瘤、骨髓瘤和髓系肿瘤，是一类起源于造血系统的恶性肿瘤，可发生在髓外组织中。传统的组织病理形态学和免疫组化染色检查存在标本处理耗时久、结果报告周期长等局限性，且在样本细胞数量较少的情况下，其检测灵敏度相对较低。流式细胞术在检测组织样本时具有检测过程快、结果报告周期短，检测结果准确性和灵敏度高等优点，可作为病理形态学和免疫组化染色检查方法的有效补充。然而，目前流式细胞术在组织样本检测的应用中，如何对组织样本进行采集与保存、如何对组织样本进行单细胞悬液制备、在样本量少的情况下如何设计抗体组合方案、如何进行检测结果分析及结果报告等方面缺乏统一的认识和规范。为推动流式细胞术在检测组织样本中血液肿瘤细胞的规范化应用，中国生物工程学会细胞分析专业委员会组织专家制定了《流式细胞术检测组织样本中血液肿瘤细胞的中国专家共识》（以下简称《共识》）。该《共识》详细阐述了流式细胞术检测组织样本的技术要点，内容涵盖样本处理、抗体组合方案设计、检测结果分析、报告内容及质量管理等环节，并重点推荐了组织样本细胞数量较少时流式细胞术检测的抗体组合方案和检测的结果分析方法。该文将针对《共识》中的重点内容进行解读，以推动其更好地应用于临床实践。

流式细胞术（FCM）作为血液肿瘤诊断、分型、疗效及预后评估的重要手段，在临床应用中展现了其独特优势［1］。淋巴瘤、浆细胞肿瘤及髓系肿瘤等血液肿瘤可发生于髓外组织。传统的组织病理形态学及免疫组化染色检查存在标本处理耗时久、结果报告周期长、样本细胞数量较少时检测结果灵敏度较低等局限性。FCM在检测组织样本时具有检测过程快、结果报告周期短，检测结果准确性和灵敏度高等优点，能够成为病理形态学和免疫组化染色检查方法的有效补充［2］。FCM通过检测组织样本中不同细胞的抗原表达特征，能够快速区分细胞的系别、分化阶段及克隆性，可用于血液肿瘤的诊断、分型、鉴别诊断及微小残留病灶（MRD）监测，同时还可为患者的预后评估、靶向治疗选择提供重要依据［3］。

然而，利用FCM检测组织样本时，在如何对组织样本进行采集与保存、如何对组织样本进行单细胞悬液制备、如何在样本细胞数量少的情况下设计抗体组合方案、如何对检测数据进行分析及结果报告等方面缺乏统一的认识和规范。为了促进FCM检测组织样本中血液肿瘤细胞的规范应用，中国生物工程学会细胞分析专业委员会组织了来自临床医学、检验医学和病理学领域的多位专家，结合国内外必威体育精装版研究和临床实践，制定了《流式细胞术检测组织样本中血液肿瘤细胞的中国专家共识》［4］（以下简称《共识》）。该《共识》内容涵盖了FCM检测的样本采集与处理、单细胞悬液的制备与评估、流式抗体选择与抗体组合设计、荧光染色与上机检测、结果报告内容、检测的局限性及结果分析时的注意事项、质量管理7个方面，重点针对组织样本细胞量较少时FCM检测的抗体组合方案及检测结果的分析方法进行了详细的推荐。该《共识》共形成10条相关建议，具体内容如下。建议1：应根据不同的病变部位选择合适的样本取材方法。用于FCM检测的组织样本应具有代表性，并有足够数量的细胞。送检样本不能使用固定剂固定，并按要求及时送检。

建议2：应根据组织样本来源部位的不同，选择合适的单细胞悬液制备方法。在FCM检测前应制备组织标本的印片或细胞悬液涂片用于形态学观察，并在FCM抗体组合方案中加入细胞活性染料（如7-AAD）进行细胞活性评估。

建议3：应根据样本细胞数量的多少，合理设计FCM检测的抗体组合方案。在细胞数量少的情况下，建议使用《共识》推荐的分步检测的抗体组合方案，以确保肿瘤细胞检测的准确性。当细胞数量极少仅能够完成一管的FCM检测时，建议优先选择《共识》推荐的“泛筛”管的抗体组合方案。实际检测过程中，可根据取材部位肿瘤的发生率，调整抗体组合方案。

建议4：参照《共识》推荐的“泛筛”管逻辑设门分析方法对组织样本中肿瘤细胞的系别进行筛查。细胞数量足够时，应根据筛查结果选择《共识》推荐的后续抗体组合方案（“分型”管）进行分层检测，并进行更为全面的诊断分析。

建议5：样本的细胞数量较少，选择“泛筛”管方案检测时，建议再保留一管单细胞悬液备用。样本的细胞数量充足，进行FCM检测时，在每支检测试管中应加入大约5×105个细胞。组织样本制备成单细胞悬液后，应尽快完成FCM检测。

建议6：流式细胞仪应定期校准以保持仪器的精确度。上机检测前应先使用校准微球调整仪器设置和光路补偿。上机检测时，应避免检测管之间的交叉污染。对于细胞数量较少的样本，应从上样检测开始时立即记录数据，直至获取完检测管中全部细胞。

建议7：FCM检测结果报告单应包含患者信息、样本类型和检测内容等基本信息，以及仪器型号、样本制备方法、所使用的抗体信息等检测信息。应对所