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概述霍乱弧菌检测的检查过程
一.采样
1.腹泻患者样本采集：
①水样便采1~3ml，成形便取指甲大小量；
②肛拭子：生理盐水浸湿采便管由肛门插入直肠内3~5cm处旋转取出；
③呕吐物采1~3ml。
2.水样及液体标本采相对静止表层水（30cm内）500ml，其他液体标本采集500ml，2~3小时内送检。
3.10-15只苍蝇作为一份标本。
4.涂抹样本采集
①2~3支无菌棉签涂抹3~5只以上水生动物表面、腮部及泄殖腔。
②2~3支无菌棉签涂抹食品或物品表面（地沟口，下水管口，水池壁涂抹，餐盘内外侧），直接放入10ml碱胨水送检。
二、动力及动力抑制试验。
三、碱性蛋白胨水（APW）增菌
①粪便、呕吐物、肛拭子与APW比例1：5，碱胨增菌同时接种庆大培养基；必要时可二次增菌；取菌膜下表层培养物0.1～0.2mL转种于10mL碱性胨水管中作二次增菌；第一次增菌37℃培养6h~8h，第二次增菌37℃培养6h~8h.
②各种涂抹标本
碱胨增菌同时接种庆大培养基；必要时可二次增菌；取菌膜下表层培养物0.1～0.2mL转种于10mL碱性胨水管中作二次增菌；一次增菌37℃6-8h，二次增菌37℃6-8h.
③水样和其他液体标本
十倍浓缩碱胨增菌法:取450mL（调pH8.8-9.0）+50mL10×APW；37℃培养（6-8h）；必要时可二次增菌。
④苍蝇标本
研磨后全部于10mL碱性胨水管中充分混匀37℃培养（6-8h）。
四、取增菌液表面下的液体，划线接种庆大平板37℃温箱培养18-24h。
五、血清学检查
①增菌接种庆大平板培养24小时后玻片凝集。
②凝集现象10-15秒可出现凝集，一分钟内不出现凝集者，为阴性。做9-10个单菌落。注意弱凝集现象；小川稻叶均凝集时做试管凝集。
③如果凝集颗粒不好，取盐水加菌两个互相对照一起看。
六、分纯：用接种环取抗原抗体复合物接种于普通营养琼脂板上分纯，37℃过夜培养
七、氧化酶试验和菌种保存
①取营养琼脂上菌落涂抹于有试剂的滤纸上,在30秒-1分钟内出现紫蓝色均为阳性；不变色或出现浅粉红后很快褪色，均为阴性。
②用接种针取单个菌落穿刺半固体培养基。
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