流式细胞仪原理和一般用法.pptVIP

Partec-ExcellenceinFlowCytometry超过41年的研发经验FCS文件结构存储于3或4个片段中文件头信息：用于鉴别FCS文件，包含鉴别文本文件片段的数值。文本信息：描述样品信息和状态的某些数值。数据：在文本信息中存储的数值的特殊格式。第31页，共49页，星期日，2025年，2月5日Partec-ExcellenceinFlowCytometry超过41年的研发经验文件头信息：文本信息：第32页，共49页，星期日，2025年，2月5日Partec-ExcellenceinFlowCytometry超过41年的研发经验参数FSC/SSC/荧光：第一个细胞第二个细胞最后一个细胞第33页，共49页，星期日，2025年，2月5日Partec-ExcellenceinFlowCytometry超过41年的研发经验数据显示的种类直方图散点图三维图第34页，共49页，星期日，2025年，2月5日Partec-ExcellenceinFlowCytometry超过41年的研发经验直方图（用于单参数分析）横坐标，X轴表示光强度，强度高的光信号靠右侧显示。纵坐标，Y轴表示数量累计，相同强度的光信号在同一横坐标点（通道）内向Y轴方向累计。FITCFITCFITCFITCFITCFITCFITCFITCFL1-FITCFITCFITC第35页，共49页，星期日，2025年，2月5日流式细胞仪原理和一般用法第1页，共49页，星期日，2025年，2月5日Partec-ExcellenceinFlowCytometry超过41年的研发经验流式细胞术流式细胞分析，又称流式细胞术（flowcytometry，FCM），是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒，测量其产生的散射光和发射荧光的强度，从而对细胞（或微粒）的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术。他综合了激光技术、计算机技术、半导体技术、流体力学、细胞化学等各门学科。第2页，共49页，星期日，2025年，2月5日Partec-ExcellenceinFlowCytometry超过41年的研发经验流式细胞术流式细胞分析，又称流式细胞术（flowcytometry，FCM），是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒，测量其产生的散射光和发射荧光的强度，从而对细胞（或微粒）的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术。他综合了激光技术、计算机技术、半导体技术、流体力学、细胞化学等各门学科。第3页，共49页，星期日，2025年，2月5日Partec-ExcellenceinFlowCytometry超过41年的研发经验特点：（1）单细胞分析。（2）快速分析。（3）多参数相关测量。（4）定性或定量分析细胞。（5）统计学意义明显。（6）分选。第4页，共49页，星期日，2025年，2月5日Partec-ExcellenceinFlowCytometry超过41年的研发经验荧光有些物质，当用光照射时，它吸收了该种波长的光后还会发射出各种颜色和不同强度的光，而当光停止照射后，这种发射的光也随之消失，这种发射的光称为荧光(fluorescence)。荧光的波长比吸收光线的波长要长些。由于物质的分子结构不同，所吸收的光和所发射的荧光波长也不同。被这些物质吸收的光称为激发光，产生的发射光即荧光。荧光的颜色多为红、蓝、绿或黄等。物质的荧光有两种，一种是自发性荧光，即组织在短波长光照射下自行发射出的荧光。如，组织中的蛋白质和脂类在紫外线照射下能发射出微弱的淡蓝色荧光。另一种荧光是诱发荧光，即细胞与荧光色素结合后，经一定波长的光线照射后发出的荧光。常用的是诱发荧光，能产生荧光的生物染色剂称为荧光染料(或称荧光色素)。第5页，共49页，星期日，2025年，2月5日Partec-ExcellenceinFlowCytometry超过41年的研发经验荧光激发与发射原理能量级激发激发态发射激光能量损失第6页，共49页，星期日，2025年，2月5日Partec-ExcellenceinFlowCytometry超过41年的研发经验免疫荧光技