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疟疾厚薄血膜的制做
和染色方法浙江省疾病预防控制中心
厚薄血膜的制做和染色方法添加标题载玻片的清洁添加标题玻片的执持方法添加标题刺血针添加标题取血的部位添加标题取血的适当时间添加标题厚薄血膜的位置添加标题厚薄血膜的血量、形状和大小添加标题厚薄血膜的涂制方法添加标题
取血的时间间日疟:一般患者发作数小时至十余小时。恶性疟:一般患者发作后20小时左右,此时环状滋养体发育至最高峰。初发时,一般需要在发作8日后才能在末梢血液中出现配子体。
将玻片划成三等分,厚血膜应位于靠右侧处,薄血膜从中间起至左格中部止。右端空格供记录姓名、编号或贴标签。厚薄血膜的位置形状和大小
血量为5立方毫米左右(一小滴),自内向外回转扩大,涂成直径厘米大小,厚薄均匀血膜。厚血膜
薄血膜血量只需立方毫米左右(约半颗粒大小),涂成舌状,长约3厘米,宽约2厘米。薄血膜
吉氏染液配制法、染色吉氏染剂粉0.5克甘油25毫升甲醇25毫升先用甲醇固定薄血膜,然后用2-5%吉氏染液,染色30分钟,水洗2-3分钟,镜检。
瑞氏染液配制法、染色瑞氏染剂粉克甘油3毫升甲醇97毫升用蜡笔在厚薄血膜之间划一道界限,再用滴管加瑞氏液5-8滴于薄血膜上,另加蒸馏水2-3滴于厚血膜上,经2分钟后,添加等量的蒸馏水(PH7.0)于薄血膜的染液中,用吸管和匀或倾侧摇匀,再引制厚血膜上,过约5至15分钟,待干镜检。未稀释的(未加入前的)染色液,切不可沾及厚血膜(因血红蛋白被酒精固定,致厚血膜呈不透明的污绿色而无法镜检)。
染色的注意事项染液的寿命与染色力的变异染色时间与温度的关系染液浓度与染色结果的关系稀释液的PH与染色结果的关系染液稀释后的使用时间在进行大量血膜染色前,对染液的稀释度、PH值和染色时间的长短是否适宜,应先用少数血膜进行染色测定。镜油易使血膜褪色,所以镜检无盖片的血膜后,应用中性二甲苯完全洗掉血膜上的镜油。
薄血片中四种人体疟原虫主要鉴别要点受染的红细胞大小、颜色。环状体(小滋养体)体积、细胞质、细胞核。大滋养体(色素颗粒、形状)裂殖体(数目、排列、颗粒)大、小配子体(形状、细胞核、细胞质、颗粒)
早期滋养体(环状体)晚期滋养体(大滋养体)裂殖体配子体厚血膜疟原虫鉴别要点
间日疟原虫环状体
间日疟原虫滋养体
间日疟原虫配子体
间日疟原虫裂殖体
恶性疟原虫大小滋养体
恶性疟原虫配子体
间日疟原虫滋养体(厚血片)
谢谢!
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