环境微生物实验指导.docx

微生物试验室安全守则

根本原则：

在试验台上不行放臵任何非试验必需的物件或私人用品。

每次工作开头及终止时，必需清理并用杀菌液擦拭试验台面(杀菌液的种类及浓度可参考表1中所列，最常用的为70%酒精水溶液)。

表1、常用杀菌药品名称及其溶液的浓度

名称 浓度

有机碘复合物四级胺化合物

酚酒精

甲醛水溶液

甲醛酒精水溶液

100～150mg/l

700～800mg/l

0.5～1%

70%(w/v,溶于水)

8%(w/v,溶于水)

8%(w/v,溶于70%酒精水溶液)

在操作过程中绝不行抽烟、吃东西。

在操作过程中必需穿上清洁的试验服，假设蓄长发须将长发束好，在试验室中任何时候皆应有整齐的装束。

试验室内的各种培育基、仪器，尤其是各种试验的样品及微生物培育，皆不行任意移至试验室外。

试验室內任何一种微生物样品，在处理时均须遵守以下事项：

◎决不行用口吸取任何一种微生物样品。

◎假设微生物样品打翻，必須以吸满杀菌液的卫生纸加以掩盖15分钟后，卫生纸才可移除，并依照一般微生物试验室的废弃物加以处理。

◎任何微生物样品在室內搬移时都必需加盖。

在任何操作过程的开头前及终止后，双手都必需用清洁剂清洗〔例如：70%的酒精水溶液〕。

微生物试验室內，任何微生物的样品、废弃物(对具感染性的废弃物应特别留意)都必需高温高压灭菌后，才能以一般垃圾处理。

操作时留意事项:

机器运转中如有不正常现象，应马上报告试验教师或任课教师，假设时间急迫，可先切断电源。

觉察仪器故障者，应在机器上清楚标示，尽到告知义务，以免发生危急。

任何药品使用前需详知其性质及使用方法，配制或使用有毒物品需戴手套口罩等操作，挥发性溶剂则需在通风柜内使用，并应随时加盖，以免发生危急。

挥发性溶剂如酒精、丙酮、乙醚、苯、二硫化碳、冰醋酸、石油醚、甲苯、二甲苯等均易燃烧，故切勿靠近火焰。不溶于水的有机溶剂着火时，切勿以水灭火，以免更助长火势集中。

不得将纸屑、玻璃碎片等流入排水管。

当加热试管内物质时，为避开烧破试管或致使试管內物质喷出，应常旋转试管或避开仅加热一处，切勿将试管口对着自己或邻座同学，以免试管内物质喷出损害自身或其他同学。

稀释浓硫酸或其他强酸应缓缓将浓硫酸参加水中，并轻轻摇摆混合，切勿加水于酸中，以免因稀释时产生大量的热，致硫酸因沸腾而溅出。

由上述各项可看出，在一般微生物试验室中，不管是何种操作过程或样品、废弃物的处理，都应以无菌操作技术为最根本的工作原则，由于只有当全部的操作步骤及处理方法均符合无菌操作技术的要求时，才能使工作者及其工作环境可能受到的污染程度降至最低，相对地便能使其工作的安全性提至最高。

试验一 一般显微镜的使用

一，目的与要求

了解一般光学显微镜的构造、功能把握显微镜的原理和使用方法

二，材料与仪器

显微镜、擦镜纸等

植物及微生物标本片

香柏油、二甲苯三，操作步骤

显微镜构造周密，使用时必需细心，要按下述操作步骤进展。

〔一〕观看前的预备

1、显微镜从显微镜柜或镜箱内拿出时，要用右手紧握镜臂，左手托住镜座，平稳地将显微镜搬运到试验桌上。

2、将显微镜放在自己身体的左前方，离桌子边缘约10cm左右，右侧可放记录本或绘图

纸。

3、调整光照不带光源的显微镜，可利用灯光或自然光通过反光镜来调整光照，但不能

用直射阳光，直射阳光会影响物像的清楚并刺激眼睛。

将10×物镜转入光孔，将聚光器上的虹彩光圈翻开到最大位臵，用左眼观看目镜中视野的亮度，转动反光镜，使视野的光照到达最光明最均匀为止。光线较强时，用平面反光镜，光线较弱时，用凹面反光镜。自带光源的显微镜，可通过调整电流旋钮来调整光照强弱。

4、调整光轴中心显微镜在观看时，其光学系统中的光源、聚光器、物镜和目镜的光轴及光阑的中心必需跟显微镜的光轴同在始终线上。带视场光阑的显微镜，先将光阑缩小，用10×物镜观看，在视场内可见到视场光阑圆球多边形的轮廓像，如此像不在视场中心，可利用聚光器外侧的两个调整旋钮将其调到中心，然后缓慢地将视场光阑翻开，能看到光束向视场周缘均匀开放直至视场光阑的轮廓像完全与视场边缘内接，说明光线已经合轴。

切忌用单手拎提；且不管使用单筒显微镜或双筒显微镜均应双眼同时睁开观看，以削减

眼睛疲乏，也便于边观看边绘图或记录。

〔二〕低倍镜观看镜检任何标本都要养成必需先用低倍镜观看的习惯。由于低倍镜视野较大，易于觉察目标和确定检查的位臵。

将标本片放臵在载物台上，用标本夹夹住，移动推动器，使被观看的标本处在物镜正下方，转动粗调整旋钮，使物镜调至接近标本处，用目镜观看并同时用粗调整旋钮渐渐升起镜筒〔或下降载物台〕，直至物像消灭，再用细调整旋钮使物像清楚为止。用推动器移动标本片，找到适宜的目的像并将它移到视野中心