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革兰氏染色的实验原理
●G＋细胞壁的网状结构致密，交联度高，用乙醇处理后，发生脱水作用，肽聚
糖层孔径缩小，透性降低，故细菌仍保留初染时的紫色。
●G－肽聚糖层较薄，交联度低，含较多类脂质，故用乙醇处理后，类脂质被溶
解，细胞壁孔径变大，通透性增加，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，细
胞被脱色，经沙黄复染呈红色。
涂片固定→结晶紫初染（碱性）→碘液媒染→乙醇（丙酮）脱色→番红复染（碱
性）
◆◆◆原理：
当用结晶紫初染后，所有细菌都被染成初染剂的兰紫色，碘作为媒染剂，它能与
结晶紫结合成结晶紫-碘复合物，从而增强了染料与细菌的结合力。当用脱色剂
处理时，两类细菌的脱色效果是不同的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要有舦聚糖
形成的网状结构组成，壁厚，类脂含量低，用酒精脱色时细胞壁脱水，使舦聚糖
层的网状结构孔径缩小，透性降低，从而使结晶紫碘复合物不易被洗脱而保留在
细胞内，经脱色和复染后仍保留初染剂的兰紫色。革兰氏阴性细菌则不同，由于
其细胞壁舦聚糖层较薄，类脂含量较高，，所以当脱色处理时，类脂质被酒精溶
解，细胞壁透性增大，使结晶紫-碘复合物比较容易被洗脱出来，用复染剂复染
后，细胞被染上复染剂的红色。
◆◆实验步骤：
1、制片
涂片——干燥——固定
2、初染
滴加结晶紫染色1——2分钟，水洗；
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