2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体课件高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptxVIP

“生物导弹”追踪癌细胞抗体第二章细胞工程第2节动物细胞工程二动物细胞融合技术与单克隆抗体

植物体细胞杂交植物细胞融合植物组织培养植物体细胞杂交技术可以跨越不同种植物之间生殖隔离的屏障，培育出新的作物类型。那么，有没有技术让不同种动物的体细胞进行杂交，培育出集不同细胞的优势于一身的动物细胞呢？温故而知新：

实例1：自然条件受精作用1970年人工条件下的人-鼠细胞融合实验实例2：人工诱导二、动物细胞融合技术

1.概念：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。3.原理：细胞膜具有一定的流动性。2.结果：形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞遗传信息的。二、动物细胞融合技术

4.诱导方法：物理法：化学法：生物法：灭活的病毒如：仙台病毒电融合法聚乙二醇（PEG)、高Ca2+-高pH法*其中灭活病毒诱导法是动物细胞融合特有的诱导融合方法二、动物细胞融合技术动物细胞融合植物细胞融合物理法：电融合法、离心法化学法：聚乙二醇（PEG)

19世纪30年代，科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象？肺结核病人病理切片病人体内病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。灭活病毒诱导法

仙台病毒紫外线灭活丧失感染活性（不感染细胞）保留融合活性（诱导细胞融合）思考.“灭活病毒”中灭活的具体含义是什么？用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。

病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。思考.灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程：灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面↓细胞膜被病毒颗粒穿通↓细胞膜连接↓细胞核融合，形成杂交细胞

5.融合实质及完成的标志：二、动物细胞融合技术细胞核的融合

（1）突破有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。（2）研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。（3）利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。种间、属间、科间，甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得成功。已成功的动物细胞融合实例有很多，如鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、人—鸡、人—蛙等上百种融合细胞。甚至已成功完成了酵母菌—鸡、人—胡萝卜等细胞的融合。6.意义：二、动物细胞融合技术

植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合前的处理方法诱导细胞融合的方法细胞融合成功的标志主要用途意义细胞膜具有一定的流动性、植物细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞聚乙二醇（PEG）融合法、电融合法、离心法；高Ca2+-高pH融合法聚乙二醇（PEG）融合法、电融合法、灭活病毒诱导法再生出细胞壁细胞核的融合获得完整的杂种植株主要用于制造单克隆抗体打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能总结：比较植物体细胞杂交和动物细胞融合

抗原动物体内刺激浆细胞抗体抗原不纯抗体不纯筛选单一B细胞不能无限增殖产生大量抗体传统抗体制备方法：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。缺陷：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。如何解决这个问题呢？

阅读P49并思考：科学家发现B淋巴细胞有什么特点？怎样才能获得大量的单一抗体？体外培养时，一个B淋巴细胞不能无限增殖我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和无限增殖能力同时具备？科学家发现：１.体内产生的特异性抗体种类多达百万种以上２.每个B细胞只分泌一种特异性的抗体单克隆抗体克隆一个B淋巴细胞细胞群抗体遗憾的是：癌细胞动物细胞融合

一个B淋巴细胞（只分泌一种特异性抗体）骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖动物细胞融合动物细胞培养单克隆抗体杂交瘤细胞阅读课本P48-49,了解单克隆抗体的制备过程一个大胆的猜想1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒发明了单克隆抗体的制备技术，于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖。

由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。1、单克隆抗体：三、单克隆抗体及其应用单克隆抗体克隆一个B淋巴细胞细胞群抗体

多种杂交细胞注射特定的抗原多种B淋巴细胞培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞诱导融合将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合2.米尔斯