2.2.2 动物细胞融合技术与单克隆抗体课件高二下学期生物人教版选择性必修三.pptxVIP

2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体

植物体细胞杂交植物细胞融合植物组织培养温故而知新植物体细胞杂交技术跨越不同种植物之间生殖隔离的屏障，实现远缘杂交育种，培育出新的作物类型。有没有技术让不同种动物的体细胞杂交，培育出集不同细胞优势于一身的动物细胞呢？

1.概念：2.原理：3.融合方法：动物细胞融合技术使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。杂交细胞：具有原来两个或多个细胞的遗传信息细胞膜的流动性PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。（化学法物理法生物法）动物细胞融合特有

401灭活病毒诱导细胞融合的原理灭活：指用物理或化学手段使病毒失去感染能力（不感染细胞），但是并不破坏病毒的抗原结构（诱导细胞融合）。病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。

5正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞应用：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。意义：至今，种间、属间、科间，甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得成功。研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。为制造单克隆抗体开辟了新途径。动物细胞融合与受精作用的区别

知识扩展动物细胞融合与受精作用的区别（1）受精作用：是在同种生物之间进行的，精子与卵细胞的融合不需要任何诱导剂，受精卵内具备同种生物的两个亲本的遗传物质。（2）动物细胞融合：可在不同物种间进行，由于物种间存在生殖隔离，所以自然条件下不能融合成杂交细胞，必须有诱导剂才能融合。形成的杂交细胞具备两个亲本细胞的遗传物质，从而体现两个亲本的遗传特性。

项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理步骤诱导方法结果意义比较动物细胞融合与植物体细胞杂交细胞膜的流动性和植物细胞的全能性细胞膜的流动性酶解法去掉细胞壁后，诱导原生质体融合，形成杂种体细胞，再经过植物组织培养形成杂种植株分散成单个细胞后诱导细胞融合物理方法、化学方法物理方法、化学方法、灭活病毒形成杂种植株形成杂种细胞克服远缘杂交不亲和障碍

81.抗体产生的流程：B1B2B3细菌1232.传统抗体的缺陷长期以来，人们为了获得抗体，采用的方法是向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后，从动物血清中分离所需抗体。这种方法不仅产量低、纯度低而且特异性差。动物体内的特异性抗体多达百万种，但是每一个B淋巴细胞只产生一种抗体?若要得到大量的单一抗体，我们该如何去做？二、单克隆抗体及其应用

3.单克隆抗体的概念:由单个B淋巴细胞经过细胞增殖，形成基因型相同的细胞群（克隆），这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体单一B淋巴细胞细胞群选择克隆产生大量纯度高特异性强的抗体B淋巴细胞不可能无限增殖如何解决这一难题？癌细胞能无限增殖，但不能产生抗体

一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖动物细胞融合杂交瘤细胞动物细胞培养单克隆抗体杂交瘤细胞：既能迅速大量增殖，又能产生抗体单克隆抗体的制备思路1975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒设计了一个极富创造性的试验方案：1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖米尔斯坦科勒

单克隆抗体制备的过程：注射特定的抗原培养骨髓瘤细胞B淋巴细胞多种骨髓瘤细胞诱导融合将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合目的：得到能产生相应抗体的B淋巴细胞融合体系中有多少种类型的细胞？能产生抗体，但不能大量增殖不能产生抗体，但能大量增殖为获得大量免疫过的小鼠B淋巴细胞，可采取的措施是分多次间隔给小鼠注射抗原。

122杂交瘤细胞(多种)13置于选择性培养基上培养第一次筛选融合的细胞BB132BB瘤瘤瘤瘤√在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长资料：细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能无限增殖。鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径。合成DNAB淋巴细胞骨髓瘤细胞氨基喋呤D途径—S途径—D途径

13(抗原-抗体杂交技术)能分泌所需抗体的杂交瘤细胞阳性细胞杂交瘤细胞(多种)第二次筛选克隆化培养、抗体检测专一抗体检验阳性：有限稀释法将杂交瘤细胞群稀释，约每孔1个细胞进行培养（克隆化培养）一段时间后，检测各孔上清液中细胞分泌的抗体上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔分泌抗体能跟特定抗原结合的细胞即为所需杂交瘤细胞多孔细胞培养板

1402单克隆抗体及其应用阳性孔抗体检测的方法——抗原-抗体杂交法在单克隆抗体制备过程中，两次筛选的目的和方法是不相同的。将杂交瘤细胞群稀释，约每孔1个细胞进行培养（克隆化培养）一段时间后，检测各