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细胞免疫检测技术

细胞免疫

vCellmediatedimmunityisanimmuneresponsethatdoes

notinvolveantibodiesbutratherinvolvestheactivationof

phagocytes,naturalkillercells(NK),antigenspecific

cytotoxicTlymphocytes,andthereleaseofvarious

cytokinesinresponsetoanantigen.

v细胞免疫（cellularimmunity）T细胞受到抗原刺激后，增殖、

分化、转化为致敏T细胞(也叫效T细胞)，当相同抗原再次

进入机体的细胞中时，致敏T细胞（效T细胞）对抗原的直

接杀伤作用及致敏T细胞所释放的细胞因子的协同杀伤作用，

统称为细胞免疫。

检测对象

l免疫细胞数量（E玫瑰花环形成实验，流式细胞术）

lT细胞亚群（间接免疫荧光法，流式细胞术,免疫磁珠）

l细胞因子检测技术（ELISA，定量PCR,Elispot）

l免疫细胞活性(淋巴细胞转化实验)

应用范围

v1、测患病个体的细胞免疫状态与水平，以

分析其发病机制；

v2、测定动物疫苗免疫或抗原注射后机体的细

胞免疫反应

v3、筛选免疫增强剂或免疫抑制剂药物，或研

究化学药物、营养成分以及物理疗法对机体

免疫功能的影响

v4、在研制细胞因子制剂过程中，测定其活性

及效价

T细胞表面受体

T细胞表面受体

v一、T细胞抗原受体

v二、细胞因子受体

v三、绵羊红细胞受体

v四、有丝分裂原受体

T细胞亚群

v辅助/诱导T淋巴细胞（CD3+CD4+）、抑制/

细胞毒T淋巴细胞（CD3+CD8+）、CD4+T

细胞纯真亚群（CD4+CD45RA+/

CD4+CD45RA+62L+）和记忆亚群（

CD4+CD45RA/CD4+CD45RO+）、功能亚

群（CD28+）、激活亚群（CD38+、

HLADR+）、凋亡亚群（CD95+）

检测技术

1.E玫瑰花环形成试验erythocyterosettetest

l实验原理人和动物外周血中T细胞表面有红

细胞受体（即CD2分子），在体外能直接

和异种或同种动物红细胞（SRBC）结合形

成玫瑰花样细胞团，以此来区分T、B。

SRBC

CD2

TB

T

左:（甲紫染色，800×）：可见2个被绵羊红细胞包围而形成玫瑰环的T淋巴细胞；

:（吖啶橙染色）：图中可见3个染成橙黄色荧光的T淋巴细胞被绵羊红细胞所包围。

lB细胞没有红细胞受体，但有免疫球蛋白Fc

受体和补体C3受体，故可用抗红细胞抗体

（A）或者补体（C）搭桥，形成EA玫瑰

环实验和EAC玫瑰花环实验。

检测技术

2.流式细胞术

在血液学、免疫学、肿瘤学、药物学、分子生物学等学科广泛应用。

免疫细胞数量（E玫瑰花环形成实验，流式细胞术）

免疫细胞活性

(淋巴细胞转化实验)

l定义流式细胞术(Flow

Cytometry,

FCM)是

免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下

呈现一种特异性荧光反应。

七十年代发展起来的高科学技术,它集计算

将指定数目的能产生

IFN-

的T细胞与一百万个抗原呈现细胞（Antigen

Presenting

Cells，APC）混合后，使用

ELISPOT

法（上图）、

胞质内染法（中图）和

ELISA

法（下图）分别测量产生

IFN-

的细胞的数目。

在血液学、免疫学、肿瘤学、药物学、分子生物学等学科广泛应用。