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石墨炉原子吸收法测定血铅 随着我国工业化的快速发展和铅利用的广泛应用，铅已成为一个重要的环境污染物。铅是全身性的毒物,它主要毒作用的靶器官是脑和造血系统。铅污染的日趋严重和损害的频繁发生已受到全社会的广泛关注。环境中的铅通过各种途径进入人体并蓄积,在血液内的铅约有95%分布在红细胞内,因此,检测全血铅的含量可以反映人体内铅水平的高低。石墨炉原子吸收法是血铅测定中高灵敏度、简便、快速的常用方法,常用的基体改进剂有钯盐、磷酸铵盐、抗坏血酸、硝酸镁等。本文将灰化后的全血样用1.0%硝酸溶液适当稀释,用具有纵向加热、横向Zeeman背景校正功能的VARIAN AA240Z石墨炉原子吸收光谱仪,选用合适的升温程序,全自动进样和添加基体改进剂磷酸二氢铵进行测定,两年来检测近百份儿童和职业铅接触者的血样,取得较好的回收率和精密度,结果满意。 1 材料和方法 1.1 涂层分散剂理性能 美国VARIAN公司AA240Z石墨炉原子吸收光谱仪,GTA120Zeeman石墨炉,PSD120自动进样器,Pb空心阴极灯(VARIAN),热解涂层分区石墨管(VARIAN)。 1.2 u3000铅标准使用液超纯水 硝酸(分析纯);美国Barnstead公司EASYpureⅡ纯水机制 18.2 MΩ 超纯水;1.00 mg/ml 铅标准储备液(江苏省疾病预防控制中心GBW(E)080383),临用时用1.0%硝酸溶液稀释为 40 μg/L 的铅标准使用液;20 g/L 磷酸二氢铵(分析纯)溶液。 1.3 样品进样和升温程序 波长 283.3 nm,灯电流 5 mA,狭缝 0.5 nm,氩气流量0.3 L/min(原子化阶段停气),测量模式为峰高,校正模式为浓度,横向Zeeman背景校正,样品进样体积 8 μl,基体改进剂进样体积 5 μl,进样总体积 20 μl。石墨炉升温程序:干燥85℃-95℃-120℃,斜坡升温并保持 45 s;灰化900℃,斜坡升温并保持 9 s;原子化2100℃,斜坡升温并保持 2.8 s;净化2200℃,保持 2 s。 1.4 标准曲线的绘制 将 40 μg/L 的铅标准使用液加入样品杯中,置于样品盘上,经仪器用1.0%的硝酸溶液自动稀释为0、10、20、30、40、50 μg/L,在上述仪器操作条件下测定吸光度,自动绘制标准曲线。 1.5 血样中样品的制备 抽取静脉血约 1.2 ml 置于预先加有 40 μl 肝素钠溶液(5 g/L)的 1.5 ml 锥形具塞聚乙烯离心管内,充分混匀,冰箱内冷藏保存。分析前恢复到室温,彻底摇匀,取 0.5 ml 血样置于 50 ml 瓷坩锅中,在调温不锈钢电加热板上小火慢慢炭化,移入马弗炉升温至380℃~400℃,灰化约 15 h,冷却后取出,加入1.0%硝酸溶液 5 ml 充分溶解。将样液加入样品杯中,置于样品盘上,按上述仪器操作条件测定吸光度,同时测定样品空白。编辑方法时应用自动稀释功能,当样液中的铅浓度超出设置的标准曲线范围时作自动稀释。 2 结果与讨论 2.1 多个样品的消解效果 样品前处理可采取湿法消解、微波消解和干法灰化3种方式。湿法消解需要人工操作和消耗大量的酸。微波消解理论上能同时处理多个样品,但我们发现,同时处理的多个样品其消解效果好坏不一,这可能是因为微波炉工作时炉内不同位置上的微波强度不同这个原因而引起的,所以最好一次处理一个样品,这显然不能适应平时大批样品的处理。干法灰化不需耗用试剂,灰化过程自动进行,大大减轻工作量。在实际操作中,我们发现当温度低于380℃灰化不彻底,当温度高于400℃时,回收率开始下降至85.0%以下,因此,控制好温度就能兼顾灰化效果和回收率。 2.2 机器条件优化 2.2.1 两步干燥或干燥时间 干燥温度和时间的选择与样品黏度、基体组成、进样量等因素有关。本试验进样总体积是 20 μl,若采用一步干燥或干燥时间太短,则会发生暴沸现象,导致测定结果明显偏低。通过试验,本法采用三步干燥,第一步85℃,5 s;第二步95℃,20 s;第三步120℃,20 s。 2.2.2 准曲线时线性偏低,信号偏低 通过试验发现,当灰化温度高于1000℃时,虽然标准曲线的线性很好,但是信号明显偏低,说明铅有较大损失;当灰化温度高于950℃时,原子吸收信号峰形稍差;选择900℃时,则信号峰形和加标回收率俱佳。 2.2.3 原子化温度和时间 通过试验观察,当原子化温度在2000℃~2200℃时,峰形和重现性都好,吸光度最大且呈平台区,从石墨管使用寿命考虑,原子化温度选择2100℃。原子化时间过长,一是峰形产生拖尾,二是影响石墨管寿命,故选择 2.8 s。 2.3 定铅和硝酸盐 钯盐是一种较好的基体改进剂,但是价格贵,高温时不易分解,残留在石墨管中,极易缩短石墨管的寿命。磷酸二