SN_T 1202-2010食品中转基因植物成分定性PCR检测方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1202—2010代替SN/T1202—2003食品中转基因植物成分定性PCR 检测方法Protocol of the qualitative polymerase chain reaction for detectinggenetically modified plant components in food2010-11-01 发布2011-05-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局#秘款 SN/T 1202--2010前言本标准按照GB/T1.1--2009给出的规则起草。本标准代替SN/T1202—2003《食品中转基因植物成分定性PCR检测方法》。本标准与SN/T1202—2003相比，主要技术变化如下：规范了专业用语和表述方式；调整了标准的适用范围（2003年版的第1章；本版的第1章），删除了以菜籽油和棉籽油为原料的食品，删除了食品添加剂,增加了以水稻、小麦为原料的食品；调整了规范性引用文件（2003年版的第2章；本版的第2章），采用了GB/T19495系列标准；-对待检样品的制备（2003年版的6.4.1；本版的6.4.1)的表述方式重新编排，增加了特定类型样品的前处理方法；-对食品中DNA的提取，采用CTAB法的部分（2003年版的和；本版的)采用GB/T19495.3中规定的方法；-对食品中核酸的定量(2003年版的6.4.3；本版的6.4.3)采用GB/T19495.3中规定的方法；修改了定性 PCR检测步骤中 PCR扩增反应类型（2003年版的 6.4.4;本版的 6.4.4），删除了荧光PCR法（参人法），增加了实时荧光 PCR方法，并在结果判断步骤中（2003 年版的6.5；本版的6.5)相应增加了实时荧光PCR检测结果判断方法；对普通PCR扩增反应及其结果判断（2003 年版的 6.3.14、6.4.4、6.5、表 1和表 4；本版的6.3.20、、6.5.1、表1、表3和表4)的表述方式重新编排，修改了反应体系，增加了引物序列,并修改了确证实验方法。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国广东出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：高东微、李丹宁、陈永红、钟玉清、张隽、董洁、徐宝梁、陈源树、谢佩心。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T 1202—2003。 SN/T 1202—2010食品中转基因植物成分定性PCR 检测方法1范围本标准规定了食品中转基因植物成分的定性 PCR检测方法。本标准适用于以大豆、玉米、番茄、马铃薯、水稻、小麦等农产品及其加工产品为原料生产的食品半成品和成品中转基因大豆（Roundup Ready）、玉米（176、Bt11、Mon81o、T14/T25、GA21、CBH351）、番茄(1345-4、351N、5345、8338、FLAVR SAVR、BioScien、8805R、Zeneca）、马铃薯（NewLeaf@Y、NewLeaf?Plus、NewLeaf）、水稻(Bt63)、小麦成分的定性PCR检测。本标准适用的食品半成品和成品不包括调味品和食用油脂。本标准能够检测出以大豆、玉米、番茄、马铃薯、水稻、小麦为主要原料生产的食品中0.1%转基因成分。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T 19495.2　转基因产品检测　实验室技术要求GB/T19495.3转基因产品检测核酸提取纯化方法GB/T19495.7转基因产品检测抽样和制样方法GB/T 27025检测和校准实验室能力的通用要求SN/T1204植物及其加土产品中转基因成分实时荧光PCR定性检验方法3缩略语下列缩略语适用于本文件。BAR(phosphinothricin acetyltransferase gene from Bacillus amyloliquefaciens):淀粉液化芽孢杆菌草丁麟乙酰转移酶基因bp(base pair):碱基对Btc(the construct specific DNA sequence of transgenic rice event Bt63):转基因水稻品系.Bt63 结构特异性基因序列CaMV 35S(35S promoter from cauliflower mosaic virus):花椰菜花叶病毒 35S 启动子CTAB(hexadecyltrimethyl ammonium bromide)：十六烷基三甲基溴化铵CryIA(b)(the crylAbl