NY_T 3342-2018花生中白墓芦醇及白墓芦醇苷异构体含量的测定超高效液相色谱法.pdf

ICS 67.060X 11NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 3342—2018花生中白藜芦醇及白藜芦醇苷异构体含量的测定超高效液相色谱法Determination of resveratrol and resveratrol glycoside isomers in peanut-Ultra performance liquid chromatography method2018-12-19 发布2019-06-01实施中华人民共和国农业农村部 发布 NY/T 3342—2018前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草，本标准由农业农村部乡村产业发展司提出并归口本标准起草单位：中国农业科学院农产品加工研究所、山东金胜粮油集团、山东东升粮油有限公司。本标准主要起草人：王强、石爱民、夏小勇、刘红芝、刘丽、胡晖、高冠勇、胡玉中。I NY/T 3342—2018花生中白藜芦醇及白藜芦醇苷异构体含量的测定超高效液相色谱法1 范围本标准规定了测定花生中白藜芦醇及白藜芦醇苷异构体（反式白藜芦醇、反式白藜芦醇苷、顺式白藜芦醇、顺式白藜芦醇苷)含量的超高效液相色谱法。本标准适用于花生仁、花生红衣、花生芽中白藜芦醇及白藜芦醇苷异构体含量的测定。本标准方法反式白藜芦醇、反式白藜芦醇苷定量检出限为2.0uμg/kg，顺式白藜芦醇、顺式白藜芦醇苷定量检出限为3.0μg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB5491粮食、油料检验扦样、分样法GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1白藜芦醇及白藜芦醇苷异构体resveratrol and resveratrol glycoside isomers反式白藜芦醇（trans-resveratrol）、反式白藜芦醇苷（trans-piceid）、顺式白藜芦醇（cis-resveratrol）、顺式白藜芦醇苷（cis-piceid)的总称，多酚类物质。具体分子式和结构式参见附录A。4原理试样中的白藜芦醇及白藜芦醇苷异构体用乙醇-水溶液提取，提取液离心后，取上清液定容，用配有紫外检测器或二极管阵列检测器的超高效液相色谱仪进行测定，以保留时间定性，外标法定量。5试剂和材料除非另有规定，仅使用分析纯试剂，实验中所用水应符合GB/T6682中一级水的要求5.1 无水乙醇(C,HsOH)。5.2甲醇(CH:OH)：色谱纯。5.3甲酸(HCOOH)：色谱纯5.480%乙醇溶液：取800mL无水乙醇（5.1），加200mL水，混匀。5.5液相流动相：A相：0.1%甲酸水溶液，取1mL甲酸（5.3），加999mL水，混匀并脱气。B相：甲醇,取1L甲醇（5.2)，脱气。5.6反式白藜芦醇(CAS号：501-36-0)：纯度≥98%。5.7反式白藜芦醇苷（CAS号：65914-17-2）：纯度≥98%。1 NY/T 3342—20185.8标准储备溶液：分别准确称取反式白藜芦醇、反式白藜芦醇苷标准品6.25mg（精确至0.01mg)，分别用甲醇（5.2)溶解并定容至250mL，得到25mg/L的单标储备液。顺式白藜芦醇和顺式白藜芦醇苷储备液是由反式白藜芦醇及反式白藜芦醇苷标准溶液置于365nm紫外光下分别照射120min和60min制得。5.9混合标准工作液：准确移取0.1mL、1.0mL、5.0mL、10.0mL、15.0mL、20.0mL反式白藜芦醇、反式白藜芦醇苷标准储备溶液（5.8），用甲醇（5.2)稀释并定容至50mL，得到一系列的标准工作溶液（质量浓度分别为0.05mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、5.0mg/L、7.5mg/L、10.0mg/L）。取适量反式白藜芦醇及反式白藜芦醇苷标准储备溶液（5.8），置于干燥洁净的培养皿中，于365nm紫外光下10cm处分别照射2h和1h，反式白藜芦醇溶液分别于20min、40min、60min、80min、100min、120min时间点取样，反式白藜芦醇苷溶液分别于10min、20min、30min、40min、50min、60min时间点取样，装人棕色液相色谱进样瓶；随后准确量取0.5mL照射120min的反式白藜芦醇标准溶液及0.5mL照射60min的反式白藜芦醇苷标准溶液，按1：1比例混合均匀，制得混合标准工作液，装人棕色液相色谱进样瓶中，于一18℃下避光保存，保存有效期为1个月。6仪器和设备6.1超高效液相色谱仪：带紫外检测器或二极管阵列检测器。6.2紫外分析仪：波长365nm。6.3冻干机：隔板温度一20℃、真空度13Pa～200Pa,凝冰温度一5