微生物实验实验五肠道杆菌和厌氧菌等.pptxVIP

微生物实验实验五肠道杆菌和厌氧菌等第1页/共47页 实验五肠道杆菌和厌氧菌、真菌第2页/共47页 一、肠道杆菌形态、培养特性及生化反应 1. 形态: 大肠杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌 2. 培养（中国兰平板） 大肠杆菌、变形杆菌、 伤寒杆菌、乙型副伤寒杆菌、痢疾杆菌第3页/共47页 3. 生化反应： （示） 双糖铁基培养基 尿素培养基 第4页/共47页 双糖铁基培养基半固体培养基固体斜面培养基第5页/共47页 成分：硫酸亚铁铵硫代硫酸钠乳糖酚红H2S试验乳糖发酵试验第6页/共47页 成分：琼脂(0.35%)(动力观察)蛋白胨水葡萄糖 酚红葡萄糖发酵试验第7页/共47页 A.接种大肠杆菌B.接种痢疾杆菌C.未接种的对照管第8页/共47页 3. 生化反应： （示） 双糖铁基培养基 尿素培养基 第9页/共47页 尿素培养基★　成份：20%尿素水溶液 　 0.6%酚红溶液★　原理：尿素酶分解尿素产氨气第10页/共47页 二、肠道杆菌分离鉴定步骤 1.粪便→中国兰平板 兰色、较大、不透明菌落----大肠杆菌 无色、较小，半透明菌落----致 病 菌 2.生化试验： 双糖铁基、尿素、吲哚 3.血清诊断第11页/共47页 操作：生化反应 接 种：1、双糖铁基 葡萄糖发酵管2、 蛋白胨水培养基 硫酸亚铁半固体培养基 菌 株： 中国兰平板(1-8)：单号；双号 —— 致 病 菌第12页/共47页 操作：生化反应 接 种：双糖铁基菌 株： 中国兰平板(1-8)：单号；双号 —— 致 病 菌第13页/共47页 接 种： 1、双糖铁基 葡萄糖发酵管 2 蛋白胨水培养基 硫酸亚铁半固体培养基 菌 株： 中国兰平板(1-8)：单号；双号 —— 致 病 菌示教1. 厌氧培养 2. 双糖铁基 3. 尿素培养基 4. R质粒接合传递 操作实验结果观察药敏试验第14页/共47页 上次试验结果观察 双糖铁基培养基结果观察 乳糖 H2S 葡萄糖 动力乙副伤寒杆菌 — + ⊕ + 痢疾杆菌 — — + — 大肠杆菌 + — ⊕ + 第15页/共47页 R质粒接合传递试验供体菌：福氏痢疾杆菌 耐链霉素、氯霉素、四环素和磺胺药物受体菌：大肠杆菌 耐利福平培养基：中国兰平板 100μg/ml利福平；20μg/ml氯霉素＋第16页/共47页 厌氧芽胞梭菌与厌氧培养法 1、形态观察 破伤风梭菌 产气荚膜梭菌 肉毒梭菌第17页/共47页 破伤风梭菌鞭毛芽胞第18页/共47页 产气荚膜梭菌肉毒梭菌第19页/共47页 2、厌氧培养法 用于专性厌氧菌的培养方法：1)将普通培养基置于无氧环境中培养 如:焦性没食子酸吸氧法2)厌氧培养基:在培养基中加氧化还原剂 如:疱肉培养基第20页/共47页 a. 原理：焦性没食子酸在碱性溶液中能迅速吸收氧气，生成深棕色焦性没食子橙，利用此法可除去试管或平皿等容器中的氧气。（1）焦性没食子酸法第21页/共47页 焦性没食子酸培养基第22页/共47页 焦性没食子酸培养基示意图血平板纱布石蜡第23页/共47页 b.培养结果观察产气荚膜梭菌血平板厌氧培养第24页/共47页 （2）疱肉培养基a.原理 动物组织耗氧法② 还原型氨基酸　 ——　谷胱甘肽③ 凡士