间接竞争酶联免疫吸附法检测骨肽的研究（职称论文资料）.docVIP

间接竞争酶联免疫吸附法检测骨肽的研究（职称论文资料） 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 2 文1：间接竞争酶联免疫吸附法检测骨肽的研究 2 1 仪器与药品 3 2方法与结果 3 3 讨论 6 文2：莱克多巴胺ELISA间接非竞争检测方法的策略 6 1 材料与实验方法建立 6 （1）酶标板吸附能力均一性检测：见表1 8 （2）抗原抗体最佳反应浓度选择（棋盘试验）：见表2 8 （3）包被温度及时间的选择：见表3 9 （4）包被缓冲液的选择：见表4 9 （5）封闭液选择：见表5 9 （6）酶标二抗反应浓度的选择：见表6、图1 10 （7）抗体反应时间的选择：见表7、图2 10 （8）酶标二抗反应时间的选择：见表8、图3 10 （9）显色反应时间的选择：见表9、图4 10 （1）酶标板的制备： 11 （2）标准曲线的绘制：见表10、图5、图6 11 （3）样品的前处理方法优化 12 （4）最低检出限实验：见表14 13 （5）交叉实验：见表15 13 （6）回收率实验 14 2 结语 14 参考文摘引言： 14 原创性声明（模板） 16 文章致谢（模板） 16 正文 间接竞争酶联免疫吸附法检测骨肽的研究（职称论文资料） 文1：间接竞争酶联免疫吸附法检测骨肽的研究 Research of indirect enzyme-linked immunosorbent assay of ossotide SHEN Fei， FENG Jing， DOU Wenxuan， YU Hui Nanjing Xinbai Pharmaceutical Co.， Ltd.， Jiangsu Province， Nanjing 210038， China [Abstract] Objective: To study the enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of bone peptide. Methods: Investigated the antigen concentration， competition time， the second antibody concentration， working hou， the color time on indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay results. Results: The detection of antigen concentration was μg/ml， competition time was 30 min， HRP secondary antibody concentration of 1∶400 of the best work， two anti-reaction time was 40 min， color time was 15 min. Conclusion: In this study， by optimizing the indirect enzyme-linked immunosorbent assay conditio， the establishment of bone peptide competition ELISA indirect detection methods， test results are stable， and there is better accuracy. [Key words] Bone peptide; Indirect enzyme-linked immunosorbent assay; Content; Determination 骨肽是采用哺乳动物的四肢骨，经一系列工艺提取而得的分子大小不规则的动物多肽。骨肽含多种骨代谢的活性肽类，具有调节骨代谢，刺激成骨细胞增殖，促进新骨形成的作用[1]。目前常用的骨肽含量测定方法主要是根据识别蛋白质多肽来进行定量。酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）是酶免疫测定技术中应用最广的技术，但在骨肽检测方面尚未见报道，本研究选用骨肽注射液为原料，建立ELISA检测法，进行骨肽的检测。 1 仪器与药品 骨肽注射液（南京新百药业有限公司，H）。抗骨肽抗体（一抗，以纯化的骨肽为免疫原，常规免疫动物制得），羊抗兔（酶标二抗，碱性磷酸酶标记）。DG3022A酶标检测仪，南京华东电子集团医疗装备有限责任公司。 2方法与结果 E