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精品文档 本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断 取上清。 大鼠( Rat)血管内皮钙粘蛋白( VE-cadherin ) 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于- 20 ℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 ELISA 检测试剂盒 自备物品 使用说明书 1. 酶标仪( 450nm ) 检测原理 2. 高精度加样器及枪头: 0.5-10uL、2-20uL 、20-200uL、200-1000uL 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验( ELISA )。往 3. 37℃恒温箱 预先包被血管内皮钙粘蛋白( VE-cadherin)抗体的包被微孔中,依 操作注意事项 次加入标本、标准品、 HRP 标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。 1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的 用底物 TMB 显色, TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的 浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解 作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血管内皮钙粘蛋 后再使用。 白( VE-cadherin )呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度 2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保 (OD 值),计算样品浓度。 存。 样品收集、处理及保存方法 3. 浓度为 0 的 S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细 书操作时样本已经稀释 5倍,最终结果乘以 5 才是样本实际浓度。 胞刺激,收集血液后, 3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心 4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 地分离。 5. 所有液体组分使用前充分摇匀。 2. 血浆:EDTA 、柠檬酸盐或肝素抗凝。 3000 转离心 30 分钟取上清。 试剂盒组成 3. 细胞上清液: 3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。 名称 96 孔配置 48 孔配置 备注 微孔酶标板 12 孔×8 条 12 孔×4 条 无 4. 组织匀浆: 将组织加入适量生理盐水捣碎。 3000转离心 10 分钟 标准品 0.3mL*6 管 0.3mL*6 管 无 。 1 欢迎下载
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