酿酒分析与检测-第四章分光光度分析.pptxVIP

第四章 分光光度分析;第三节 紫外分光光度法 一、双乙酰的测定 二、啤酒花中α-酸、β-酸的测定 三、总酚的测定（福林-肖卡法） 四、苦味质的测定 第四节 原子吸收分光光度法 一、氧化钙的测定 二、铁的测定 三、铜的测定 四、铅的测定 五、锰的测定;第一节 分光光度法基本理论一、基本概念;二、基本原理 ;确定最大吸收波长，然后以此波长的光为光源，测定一系列已知浓度C溶液的吸光度A，做出A-C工作曲线。在分析未知溶液时，根据测量的吸光度A，查工作曲线即可确定出相应的浓度。这便是分光光度法测量浓度的基本原理。;三、分光光度法的特点 1. 灵敏度高 2. 选择性较好 3. 准确度高 4. 适用浓度范围广 5. 分析成本低、操作简便、快速、应用广泛 四、分光光度法的基本应用 1. 测定溶液中物质的含量 2. 用紫外光谱鉴定化合物 3. 反应动力学研究 4. 纯度检验 5. 氢键强度的测定 6. 络合物组成及稳定常数的测定;第二节 可见分光光度法一、甲醇的测定（变色酸比色法）;（三）实验材料与仪器;（四）实验步骤（略/见书）（五）结果计算;（六）注意事项;（5）本试验取用量很小，而且甲醇、乙醇易挥发，故加样后应立即加磷酸和高锰酸钾反应。 （6）忌用直火加热，因硫酸量较多、浓度又高、试管小、直火加热难控制温度，不小心容易溅出伤人，不安全。另外，加热温度过高，部分炭化，紫红色中显出明显的褐色，影响色泽观察。;二、啤酒中甲醛的测定;（三）实验材料与仪器;3. 主要仪器： 紫外可见光分光光度计、电子分析天平、恒温水浴锅、水蒸气蒸馏装（带有500 mL蒸馏瓶） 玻璃仪器：烧杯、量筒、100 mL容量瓶、200 mL容量瓶、比色皿、带塞比色管、移液管 ;（四）实验步骤（略/见书）（五）结果计算;（1）实验所用乙酰-丙酮溶液必须现用现配，否则会影响实验结果的准确性。 （2）配制一定浓度的氢氧化钠溶液以及硫酸溶液，必须带手套操作，注意安全。 （3）本方法中的???馏可采用两种方式：直接火加热与水蒸气蒸馏。其中，直接火加热存在一定的问题：一是甲醛提取不完全，提取率不到90%。二是蒸馏样品时，容易出现糊焦现象，发生副反应，导致结果偏高。主要是由于温度高，氨基酸及糖容易发生降解产生甲醛，产生假阳性结果。但采用水蒸气蒸馏则无此问题，而且乙醛对测定结果也无影响。;三、白酒中糠醛的测定（苯胺法）;（三）实验材料与仪器;（四）标准曲线的绘制;（五）注意事项;四、蒸馏酒中氰化物的测定;（三）实验材料与仪器;（四）实验步骤（略/见书）（五）结果计算（略/见书） （六）注意事项 （1）按照国标法GB /T 5009. 48-2003的操作进行测定时发现，未经预处理的白酒样品，在加入异烟酸-吡唑啉酮溶液后，会出现乳白色浑浊，干扰显色反应，无法比色测定。因而必须先对白酒样品进行预处理，消除基体干扰，避免测定时浑浊现象的发生。 （2）温度对吸光度存在一定的影响，反应温度小于25℃时，显色不完全。当温度大于35℃时，反应显色不稳定，吸光度降低。 （3）国标中显色剂吡唑啉酮用N,N-二甲基酰胺溶解，但N,N-二甲基酰胺毒性大，可经呼吸道或皮肤进入人体引起中毒。实验中可选用无水乙醇作为溶剂，毒性小。 ;（4）反应的pH值会直接影响显色的吸光值，因此必须控制吸收液的碱浓度和磷酸盐缓冲液的缓冲容量。每次实验前，必须以pH世界测量缓冲液的pH值。pH在6.8-7.5范围内，吸光度最大，pH值大于7.5或小于6.8时，吸光度均显著降低。 （5）因为市售的吡唑啉酮是浅黄色的，因此若反应中的吡唑啉酮浓度增大，会增加反应的本底值，部分掩蔽反应颜色，使显色不明显。在吡唑啉酮的最佳浓度范围是0.04%-0.05%，此时吸光值较高，稳定性也比较好，且对本底值几乎不产生影响。 （6）当室温偏低时，加入氯胺T后，必须放置3-5 min，否则氯化反应不完全。但反应亦不可过长，反应时间过长，显色不稳定，吸光度降低。反应时间设为40 min左右较好。;五、黄酒中氨基酸态氮的测定（茚三酮法）;（三）实验材料与仪器;（四）实验步骤（略/见书）（五）结果计算;（六）注意事项;第三节 紫外分光光度法一、双乙酰的测定;（三）实验材料与仪器;双乙酰蒸馏装置;（四）实验步骤（略/见书）（五）结