04第四章药物定量分析与分析方法验证.pptxVIP

第四章 药物定量分析与分析方法验证; 第四章 药物定量分析与分析方法验证;第一节、定量分析样品前处理方法;泛影酸;;酒石酸锑钾;定量分析样品前处理方法;经有机破坏的分析方法;A.燃烧瓶 B.铂丝网 C.D.盛固体样品滤纸及其折叠法 E.F.G.称取液体样品方法;;碘苯酯含量测定;日本和英国生物学家共同获得诺贝尔生理学或医学奖 ;近年诺贝尔生理学或医学奖 得主及其主要成就 2011年，美国科学家布鲁斯·博伊特勒、法国科学家朱尔斯·霍夫曼和加拿大科学家拉尔夫·斯坦曼。他们发现了免疫系???激活的关键原理，这使人们对人体免疫系统的认识有了革命性的改变。 2010年，英国生理学家罗伯特·爱德华兹。他在体外受精技术领域做出的开创性贡献。 2009年，美国科学家伊丽莎白·布莱克本、卡萝尔·格雷德和杰克·绍斯塔克。他们解决了一个生物学的重要课题，即染色体在细胞分裂过程中是怎样实现完全复制，同时染色体如何受到保护而不至于发生降解。;两位美国科学家分享2012年诺贝尔化学奖 ; G蛋白偶联受体是一种与三聚体G蛋白偶联的细胞表面受体。含有7个穿膜区，是迄今发现的最大的受体超家族，其成员有1000多个。与配体结合后通过激活所偶联的G蛋白，启动不同的信号转导通路并导致各种生物效应。;近年诺贝尔化学奖得主及其主要成就回顾;容量分析法：将已知浓度的滴定液（标准物质溶液）由滴定管滴加到被测药物的溶液中，直至滴定液与被测药物反应完全（用适当方法指示），然后根据滴定液的浓度和被消耗的体积，按化学计量关系计算出被测药物的含量。 光谱分析方法 UV-VIS分光光度法 荧光分析法 色谱分析法 HPLC法 GC法 液质联用法 ; 目的： 证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求 效能指标： 评价分析方法的尺度 效能指标内容包括: 精密度, 准确度, 检测限,定量限,选择性, 线性和范围, 耐用性;(1)准确度（Accuracy）： 测量值与真实值接近的程度 表 示: 回收率 测定方法：回收试验 加样回收试验 数据要求：至少用9个测定结果进行评价（3浓度，3次）；报告中包括回收率（%）、RSD或可信度。;(2)精密度（Precision ）：;(3)专属性（Specificity）：;(4) 检测限（limit of detection， LOD）： 药物能被检出的最低浓度（μg/ml） 测 定: 信噪比法（S:N=3） (5) 定量限（1imit of quantitation，LOQ）： 药物能被定量测出的最低浓度（μg/ml） 测 定: 信噪比法（S:N=10）;(6) 线性与范围（linearity and range）： 待测物浓度与响应值成线性关系的浓度范围 线性关系：Y = a + bx（r=0.9999) 线性程度：相关系数 至少5个浓度 ;(7) 耐用性（robustness）: 测定条件稍有变动时，对测定结果的影响程度。 HPLC法变动因素有：流动相组成与pH，色谱柱，柱温，流速等。 GC法变动因素有：色谱柱，固定相，担体、柱温、进样口和检测器温度等。 ;检验项目和验证内容：;第四节 生物样品分析的基本要求; 生物样品包括各种体液和组织，但实际上最常用的是比 较容易得到的血液（血浆、血清、全血）尿液、唾液。 血样: 血浆（plasma）和血清（serum）是最常用的生物样品。 唾液: 尿液:; （一）去除蛋白质 1．加入与水相混溶的有机溶剂 2．加入中性盐 3．加入强酸 4．加入含锌盐及铜盐的沉淀剂:与Pr羧酸 5．酶解法 （二）缀合物的水解 （三）有机破坏：金属离子---消解剂 （四）分离、纯化与浓集 1．液-液萃取法（liquid-liquid extraction , LLE） 2．液-固萃取法（liquid –solid extraction, LSE） 3．被测组分的浓集 ;三、定量分析方法的验证 ----------生物样品分析;（四）最低定量限LOQ 3～5倍t1/2，或1/10～1/20倍Cmax （五）样品稳定性 室温、冻融、长期冰冻 （六）提取回收率（绝对回收率） 一般低