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主要目的: ——为了测定样品清除ABTS自由基的能力。 主要原理: ——用 K2S2O8 与 ABTS 直接生成稳定的阳离子自由基 ABTS+,抗氧化物质与ABTS+发生反应而使反应体系褪色。 实验室签章 试剂 ——K2S2O8水溶液 ——ABTA溶液 ——乙醇(分析纯) ——PBS 溶液 仪器设备 ——96孔酶标板 ——UV-Vis可见多功能酶标仪 ——移液枪 ——200 μL量程枪头 实验方法 ◆前期准备 ABTS储备液(7.4 mmol/L)取ABTS 96 mg,加蒸馏水25 mL。 K2S2O8储备液(2.6 mmol/L)取K2S2O8 378.4 mg,加蒸馏水10 mL。 将5 ml 7.4 mmol/L ABTS储备液与88 μL 2.6 mmoL/L K2S2O8混匀,静置12-16小时,配制成ABTS工作液。 ◆ABTS自由基清除法 0.4 mL ABTS工作液,用 PBS 溶液稀释,要求在常温下734nm 处吸光值为 0.7±0.02。0.2 mL ABTS+·工作液与 10uL 不同浓度受试物混合,常温避光静置 6min,在 734 nm 波长处测吸光度,平行3次。 ABTS自由基清除能力由下式计算: 清除率(%)=[A0-Ai/A0]×100% 式中: A0 为不加样品,加入 ABTS 的吸光度;Ai 为加入样品和 ABTS 的吸光度
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