铜陵新桥矿区土壤中耐Cu微生物的筛选研究.pdfVIP

生态环境学报 2010，l9(1)：118—122 http：／／www．jeesci．corn EcologyandEnvironmentalSciences E-mail：editor~ieesci．com 铜陵新桥矿区土壤中耐 Cu微生物的筛选研究 刘丽，李湘凌 ，范丽，王成慧，杨善谋，袁峰，周涛发 合肥工业大学资源与环境工程学院，安徽 合肥230009 摘要：选择安徽铜陵新桥矿区富cu的污染土壤 ，充分利用微生物受 自然环境重金属胁迫而产生耐性这一特点，进行土壤中 耐cu微生物的筛选研究。实验过程中分别配制三种不同的培养基，细菌、真菌和放线菌培养基。在水浴恒温振荡器中对土 壤中耐受重金属的微生物进行驯化，将得到的对 Cu2耐受性最高的液体培养基作为菌源，在琼脂平板培养基上进行划线分 离，并将得到的纯菌株在光学显微镜下进行形态观察，菌种经试管斜面富集培养后保存在 4℃冰箱中以便后续使用。研究 发现，土样中细菌和真菌对 cu的耐受性低，最高耐受质量浓度分别只达到500mgL·和 1100mgL·～。而放线菌表现出Cu 高耐受性，分离得到的放线菌耐受Cu的质量浓度最高达到 10000mgL·一，初步鉴定该放线菌株为链霉菌属。该放线菌菌种 可能同时对Cu有吸附降解特性，具有成为污染土壤生物治理的高效耐受吸附菌种的潜力巨大。 关键词：土壤；Cu；耐受微生物；放线菌；污染修复；铜陵 中图分类号：X172 文献标识码：A 文章编号：1674．5906(2010)01．Ol18．05 随着社会经济的不断发展，土壤的重金属污染 为进一步的重金属吸附特性研究奠定基础 。 日益加剧。重金属进入环境后不能被生物降解且往 1 材料与方法 往参与食物链循环并最终在生物体内富集，破坏生 1．1 样品采集 物体正常的新陈代谢，最终危害人体健康 1【]。对土 采集的土壤样品位于铜陵市新桥矿区露天采 壤重金属污染治理的途径有多种，现代生物技术的 场边。除去表面浮土，采集深度约20cm的表层土 发展，使微生物治理重金属污染逐渐受到重视。微 样，样品装于已灭菌的牛皮纸信封中，密封并置于 生物种类繁多，繁殖迅速，对各类污染物都有较强 冰箱在4oC条件下保存备用。 较快的适应性，微生物对某些重金属的吸收、沉积、 1．2 微生物培养基的制备 氧化和还原等作用可有效减少植物摄人，从而降低 分别配制三种不同的培养基，以用于分离土壤 重金属的毒性 J。目前环境科学中最活跃的研究领 中的细菌、真菌、放线菌。三种培养基的配制 l【7] 域是应用遗传基因工程等生物技术来培育对重金 如下。 属具有降毒能力的微生物，借此消除、修复重金属 (1)细菌培养基：牛肉膏3g，蛋白胨 10g，氯 对土壤的污染 4【J，其 中微生物如细菌、真菌、酵母 化钠 5g，琼脂 20g，蒸馏水 l000mL；pH7．0。 菌等的重金属耐受和吸附特性研究是至关重要的 (2)真菌培养基 ：黄豆芽 100g，葡萄糖 20g， 一 环，这一研究也已逐渐深入开展pJ。 琼脂 2Og，蒸馏水 1000mL，自然 pH。 金属矿区土壤是一类特殊的土壤，金属矿山开 (3)放线菌培养基 (高氏一号培养基)：可溶性 发的采、选、冶都会向环境中排放重金属元素 叭， 淀粉20g，氯化钠0．5g，硝酸钾 1g，磷酸氢二钾 矿区周边的生态环境特别是土壤中重金属的污染 0．5g，硫酸镁0．5g，硫酸亚铁0．0lg，琼脂20g， 已成为严重的环境污染问题 1【 J。铜陵地区是我国 蒸馏水 1000mL，pH7．4~7．6。 重要的铜工业生产基地之一，但发达的矿业活动同