生理学实验报告蛙心灌流.pdf

生理学实验 2009.12.09 实验名称： 蛙类离体心脏灌流 课程名称： 生理学实验 指导教师： 龙天澄 张碧鱼 陈笑霞 实 验 人： 叶永锋 学 院 ： 海洋学院 实验时间： 2009 年 12 月 09 日 1 生理学实验 2009.12.09 一、【目的要求】 1、学习斯氏离体蛙心灌流法。 2、了解心肌的生理特性。 + + 2+及肾上腺素 ( Adr) , 乙酰胆碱 ( ACh) 等对离体心脏活动的影响。 3、观察 Na ,K ,Ca 二、【原理】 将离体蛙心 （失去神经支配的蛙心） 保持在适宜的环境中， 在一定的时间内仍然能够保 持节律性收缩， 心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境， 离体心脏也是如此， 离体 心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分， 观察其对心脏活动的作用。心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙 等离子有关。血钾浓度过高时（高于 7.9mmol/L ），心脏兴奋性、自律性、传导性及收缩性 都下降，表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞，严重时心脏可停搏于舒张期。 血钙浓度 升高时，心脏收缩力增强，过高可使心室停搏于收缩期。血钙浓度降低，心肌收缩力减弱。 血中钠离子浓度的轻微变化， 对心肌影响不明显， 只有发生明显变化时， 才会影响心肌的生 理特性。 肾上腺素可使心率加快、 传导加快及心肌收缩力增强， 乙酰胆碱则与肾上腺素的作 用相反。 三、【实验仪器】 青蛙、 常用手术器械、蛙板 (或蜡盘 )、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双 凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿 (或小烧杯 ) 、纱布、棉线、橡皮泥、任氏液。蛙 心套管 (斯氏套管或八木氏套管 )、套管夹、 0．65 ％NaCl 、5％ NaCI 、2 ％CaCl2 、1％KCl 、1： 5 000 肾上腺素、 1：10 000 乙酰肌碱、 300U ／mL 肝素。 四、【方法与步骤】 1、斯氏蛙心插管法 （1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中， 按前面的方法暴露心脏。 仔细识别心脏周围的大 血管 (见右图 ) 。在左主动脉下方穿一线，于动脉 圆锥处结扎 (动物个体小时， 结扎位置可靠上些 ) 。 再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备 用。左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪 在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜 口。选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量 (套管内 2～3 cm 高度 )任氏液 ( 内加入一滴肝素溶 液) 的斯氏蛙心套管， 山开口处插入动脉圆锥 (见右图 ) 。当套管尖端到达动脉圆锥基部时， 应 将套管稍稍后退， 使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进， 经主动脉瓣插入心室腔 内( 于心室收缩时插入，但不可插得过深，以免心室壁堵住套管下口 )。此时可见套管中血液 冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，表明操作成功 (否则需退回并重新插入 )。用滴 管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。稳定住