应用对流免疫也泳法鉴定胸麟孵炎嗜纽符血清-黑龙江八一农垦大学.pdf

兽龙江八一农垦大学学报 1989年第 1期 JOilf． ofH oilOllgJi0I1若 A ～usLFirstLand Recldm tio．I 应用对流免疫也泳法鉴定胸麟孵炎 嗜纽符 血清 ● 汪广荫 朴范泽 艾玉琴 王淑芝 徐 春厚 摘要 本文雉立的时流免疫技术 可用 于胸膜 肺炎 嗜血 秆菌 h · )阳血 {。： 鉴 定 应 ● 用0．05M,PH8．0的巴比妥缓冲液，以自行制备的已知血清型兔免疫血lj矗 。i·_J【甜提出 抗原，通 电20—45分钟获得结果。本法 比琼脂扩 敞法敏感 8—12倍，克服 2一ME试 管 凝集 试验不能检测 自身凝集菌株的缺点，不存在种间、血清型问交叉反 ，是一种快速、敏感和 特异的方法。 关键词 对流免痤电泳 胸膜肺炎嗜血杆菌 血清型 琼脂扩散试验 由胸膜肺炎嗜血杆菌 【HaemophilusPleurpnoulnoniae(H．f)]引起的猪胸膜肺炎 病，多呈急性经过并伴有高的死亡率，给 世界各国的葬猪业造成严重的经济损失。我国猪群 中也检出了本菌特异抗体，表明已存在胸膜肺炎嗜血杆菌的传染Cl 。据强导 【2]，本菌 已 发现12个血清型 不同的血清型对猪的毒力不同，主要血清型问无显著。交叉兑缝 在渗断 和防治上，胸膜肺炎嗜血杆菌的血滑型鉴定具有重要意义。丘l年来， 佃 外学行在率 曲血清型 鉴定方面做了大量研究工诈，已报寻有试 凝集．协 同缝染，问凄血妊．免焘荧光 ．Iu琼脂 散等技术。这些技术分别有磉怍费用，成 #过高，削怠 指卯，对 自身凝桌省珠 ．强分型尊 r 0 、， ● 、 弱点 。“ ，尚待进一步改进 我 们 在 研究中，建立r一种对流免瘫 皂球泼求，柱 # n V 血清型鉴定 中收到 良好效果 试验农明这种新的技术具 占决逮，特异舶敏感的 寺『点 4 C ， 一一． ”J【 l 材料和方法 ● 1．1 蒈种 胸膜肺炎嗜血杆菌l一△血清型茁种凉 =∞，j10pe40203o／04／85llJ·IJ typel，S153630／08／85I{·P typo2J5142l2／12／g4 type3，M3214 15／2／ 5 H ·P type4，K17／529／03185 ype5 出口术国带 葺产』：#爵甚 ≥ 家 傲上由教研 ● 室 白幡敏一教授意赠。大肠杆茁 ，变JfF菌 ，产气杆菌，多乐 往也 氏秆 ，旋疽杆菌( 蓐株)， 金色葡萄球菌 猪丹莓{：子菌襁兽疫链球宙冻千囟种均购 自 监所 ． 2 免疫家兔用H ·J| 津抗原 的蒯哥 参黑MitLdl扳 a-．d 越L3J，每一巧兜 脂 、 扳培养18小时的生长物，j}j3ml含0，3师￡p醚的生理盐水小心 cJ 置 缸48小 I后， 免 疫家兔制备各血漪型血清。 r 0 、 1．8 H P血清型兔宛疫血清 曲制备 参麒Mittaj报导 ¨方 浊 ，用 上 述 甲醯 处理 的ll·I‘{}I血清型的全菌休怂液， 55n…1泌K，酾0J1)甑为 I．o 0家鬼静辣 I射 螽 J0 免疫六次。缚 { 刹量投0．5， l，2， u3nl递增 戢 二二坟托3_lJ1活 “，蟮趺 瞒 - l988—0一O5收稿 48 黑 龙 江 儿 一 农 垦 大 学 学 报 脂 末次接种后 ～埘，果血、 离血 ．J。． 30℃ ． 4 I{·I 血骑型简 ：0抗 ‘0 ．}匀 肺炎嗜血杆菌备型茵 ：来攻时照j日其他茁 种分别接种于巧此办