课件：口七蛋白质结构.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 意义： 根据生物体环境的变化，不断调整蛋白质的活性，以便更好地完成其生理功能 * 举例： HbA α2β2+血红素 亚基之一与O2结合 导致亚基间的盐键断裂 构象轻微变化 （紧密T型 松弛R型） 其它亚基与O2结合力 * 构象改变，功能改变 (分子伴侣) 蛋白质构象疾病 一级结构正确，空间构象改变 蛋白质折叠错误 举例 人纹状体脊髓变性病 老年痴呆症 亨丁顿舞蹈病 疯牛病(朊病毒PrP) * 第六节 蛋白质的理化性质 大分子胶体颗粒 蛋白质分子直径≥10nm 亲水胶体 电荷层 水化层 应用 透析方法分离蛋白质 蛋白质沉淀 一、大分子亲水胶体性质 * 多价兼性离子 N端：-NH2 C端：-COOH R基团 在不同pH溶液中电离，带不同电荷 等电点 大多数人体蛋白质pI=5.0 在pH7.4环境下成阴离子 应用 电泳方法分离、纯化、定量蛋白质 二、两性电离与等电点 pH 8.6 电泳缓冲液 ? ? 白蛋白 ?1 ?2 ? ? 原点 * 紫外特征性吸收峰 λ=280 nm 应用 蛋白质定性、定量方法 三、紫外吸收特征与蛋白质定量分析 * 1、概念 在物理或化学因素作用下，蛋白质空间结构破坏,一级结构未破坏，理化性质改变（溶解度降低）、生物活性丧失。 四、蛋白质的变性(denaturation) * 变性因素 物理因素： 加热、紫外线、X射线 化学因素： 乙醇、尿素、胍、强酸、强碱、重金属盐 机制 蛋白质空间结构破坏 一级结构未破坏 性质的变化 结晶能力消失 黏度增加 易被蛋白酶水解 水溶性降低 生物活性丧失 2、特点： * 防止蛋白变性 低温保存 防止蛋白制剂/蛋白质药物的变性失活 免疫球蛋白/酶蛋白/疫苗蛋白/蛋白质类激素 使蛋白质变性 使细菌蛋白质变性失活，消毒杀菌 日光、紫外线、高压蒸汽、酒精、红汞 3、实际应用 * 4、蛋白质复性 ---可以复性，但大部分情况下难以复性 * 5、蛋白质变性与别构的区别 蛋白质变性 蛋白质别构 作用因素 物理、化学因素 生理小分子 空间结构 破坏 紧密/疏松 一级结构 不变 不变 结果 理化性质改变 生物学活性丧失 生物学活性升高/降低 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * * * * * * * * * * * * * * 无规卷曲（ random coil） 是蛋白质中一系列无序构象的总称 是蛋白质分子结构与功能的重要肽段 蛋白质二级结构主要的维系键：氢键 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * 蛋白质的超二级结构 （super secondary structure） 和结构域（domain） 蛋白质的超二级结构（模体，motif） 蛋白质多肽链上的一些二级结构单元， 有规律地聚集起来， 形成αα，βββ，βαβ, β2α, αTα 等结构称为超二级结构。 例如：基因表达调控中的转录因子（具备功能） （锌指，亮氨酸拉链、αTα、 β2α ） * 蛋白质的超二级结构 （super secondary structure） 和结构域（domain） 结构域（domain） 单个或多个超二级结构进一步集结形成在蛋白质分子空间结构中可明显区分的区域称为结构域。 结构域又是蛋白质分子上的一个功能单位，亦可称为功能域。 例如：脱氢酶蛋白、细胞膜受体蛋白 * 接受细胞外信号分子 激活细胞内信号分子 * 蛋白质的超二级结构 （super secondary structure） 和结构域（domain） 重要性 蛋白质的功能单位，二级与三级结构的重要过渡层次。 蛋白质家族（protein family)： 因含有一些相同的结构域， 而生成一些具有相同功能的蛋白质。 例如：G蛋白偶联受体家族 * （三）蛋白质的三级结构 (tertiary structure) 1、定义 在二级结构的基础上，包括相距较远的氨基酸残基及其侧链R基团形成的整个多肽链的空间构象。 * 2、蛋白质三级结构特点 自然界大多数蛋白质的 空间结构特征 具备生物活性 球状或椭圆状蛋白质 形成亲水表面和疏水内核， 表面也可有些“沟”“穴” 维系键：疏水键 举例： 肌红蛋白 免疫球蛋白 * （四）蛋白质的四级结构(quaterna