马铃薯晚疫病菌抗阿米西达突变体的诱导及其DNA指纹分析-植物病理学专业毕业论文.docxVIP

摘要 摘要 由于马铃薯晚疫病菌对常用杀菌剂抗药性的产生，明显降低了化学防治晚疫病的 效果。本研究从马铃薯晚疫病菌对杀菌新药一阿米西达的敏感性测定、抗阿米西达菌 株的诱导以及抗阿米西达分子标记筛选等方面进行研究，旨在初步评价马铃薯晚疫病 菌对阿米西达的抗性风险，并得到能够用于鉴定阿米西达抗、感菌株的分子标记。为 阿米西达的科学使用和马铃薯晚疫病菌对阿米西达产生抗药性后治理策略的制定提 供理论依据。 1．测定了采自不同地区、不同年份的30株马铃薯晚疫病菌菌株对阿米西达的敏 感性。结果表明：不同地区、不同年份的马铃薯晚疫病菌菌株对阿米西达均表现敏感， 其抑制马铃薯晚疫病菌菌丝生长的ECso值介于0．0351～O．1492pg／mL．此外，马铃薯 晚疫病菌对阿米西达和甲霜灵之间没有正负交互抗药性． 2．建立了马铃薯晚疫病菌对阿米西达的敏感基线，其ECso值为0．0604-4-0．0226 pg／mL· 3．选取5株对阿米西达敏感的马铃薯晚疫病菌菌株进行阿米西达驯化抗性诱导 和人工诱变(阿米西达+紫外线)，获得了l株对阿米西达具有稳定的低水平抗性菌株 X-DC98—3，抗性水平是野生菌株的20倍。获得的其它对阿米西达具有低水平抗性的 菌株，经过抗性稳定性验证发现，抗性程度均有不同程度的下降，抗性不稳定。 4．利用AFLP分子标记对阿米西达诱导后的抗性菌株和诱导前的野生敏感菌株 进行研究，从144对AFLP引物组合中筛选出8对引物组合能在诱导后的抗性菌株和 诱导前的野生菌株之问扩增出差异性条带。其中：引物组合E4／M5、E4／M8、E7／M5、 E15／M6、E16／M9均能在菌株X．DC98．3与DC98-3之间扩增出l～2条稳定的特异条 带；引物组合Ei9／M4除能在菌株X．DC98．3中扩增出一条稳定250bp左右的特异条 带外，在菌株X．DC98．3、X．DF08．1和DIC08．1中均能扩增出170bp左右的特异条带； 引物组合E15／M19在菌株X-DC98．3和Uv．HDOl-4中均能扩增出稳定280bp左右的 特异条带；引物组合E20／M1l在菌株X．DC98-3、A．HH00．2、A-HW00-5和UV-HD01-4 中均能扩增出稳定200bp左右的特异条带。 5．用2个SSR引物Pi4B和Pi4G对阿米西达诱导后的抗性菌株和诱导前的野生 敏感菌株进行SSR基因型分析，所有抗性菌株与它们的野生敏感菌株间的SSR基因 型均没有发生变化，说明马铃薯晚疫病菌的SSR基因型与其对阿米西达抗性可能没 有相关性。 关键词：致病疫霉；阿米西达；甲霜灵；抗药性；分子标记 Inducement Inducement ofAzoxystrobin-他sistanee Mutants ofPhytophthora infestans and Its DNA Fingerprint Analysis hbm订candidate：DU Hong-zhong Maj叱Plant Pathology Supervisor：．刃}I_U Jie_-hua Abs仃act Bccau．船of fungicide resistance of Phytophthora infestana，the effect of fungicides was decreasing on potato late blight In this paper,the sensitivities of P．infestans to azoxysnobin were determined,the azoxystrobin-resistance mutants of P．infestans WCIO induced．and molecular marker of尸．infestana to azoxystrobin resistance was detected．11坞 results derived from this study w砌d preliminarily evaluate the risk of P．infestans to azoxysla-obin resistance and gain the molecular marker which could be applied to identi母 the azoxystrobin-resistant and azoxystrobin．sensitive isolates of P．infestana．A theoretical basis was provided for the scientific application of azoxystrobin and the development of managi