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目 目 录 中文摘要 3 英文摘要 5 符号说明 7 前言刖舌 8 材料和方法 12 实验结果 16 讨论 17 结论 24 附表 25 附图 26 参考文献 29 综述 ·· ·33 致{射 42 攻读学位期间发表的学术论文 43 L Attached Attached list . . .. . .. ... ..25 Attached drawing . . . . ..26 Reviews 33 Acknowledgment . . . ...42 Published articles........................... . ................. ..... .............z13 2 山东大学硕士学位论文慢性阻塞性肺疾病及糖尿病大鼠肺泡灌洗液SIgA的含量测定 山东大学硕士学位论文 慢性阻塞性肺疾病及糖尿病大鼠肺泡灌洗液SIgA的含量测定 研究生李廷天 导师 杨艳平教授 中文摘要 目的建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)、糖尿病(DM)和慢性阻塞性肺 疾病并糖尿病(COPD+DM)大鼠模型,测定其肺泡灌洗液(BALF)中分泌型 免疫球蛋白A(SIgA)含量,观察上述不同疾病时BALFq了SIgA含量的变化和肺 组织的病理改变. 方法将48只大鼠随机分成COPD组、DM组、COPD+DM组和正常组,每 组12只。大鼠实验环境中预饲养1周后,建立DM模型。建模前禁食12h,按60mg/kg 剂量一次性腹腔注射链脲佐菌素溶液,72d时后,断尾采集空腹静脉血,用血糖 仪测定血糖,以血糖值高于16.7mmol/L者视为糖尿病造模成功。1周后用气道内 滴入脂多糖(LPS)和被动吸烟的方法建立COPD大鼠模型。COPD+DM组在DM大 鼠成模后,与COPD组采用相同方法建立模型。各组大鼠成模后,所有大鼠均用 10%水合氯醛4mL/kg做腹腔麻醉,大鼠呈呈仰卧位固定于操作台上,开胸取右侧 肺组织,用10%甲醛固定,石蜡包埋、切片、苏木素/伊红(脏)染色,光学显 微镜下观察各组肺组织病理变化。同时对左侧肺组织进行肺泡灌洗,并采用酶联 免疫吸附测定法(ELISA)测定肺泡灌洗液qbSIgA的含量。 结果①各组大鼠肺组织病理学改变:正常组大鼠肺泡大小正常,结构完 整,支气管纤毛排列整齐,未见炎性细胞浸润。COPD组大鼠支气管粘膜上皮脱 落,肺间质及气道管壁有炎性细胞浸润,肺泡腔扩大,肺泡壁变薄、断裂,部分 融合成肺大疱。DM组大鼠支气管上皮纤毛有倒伏现象,毛细血管增多,基膜下 有炎性细胞浸润,肺泡间隔增宽,肺间质增加,胶原和弹性蛋白显著增加。 COPD+DM组支气管粘膜上皮脱落严重,肺间质及气道管壁有大量的炎性细胞浸 润,肺泡结构破坏严重,部分融合成肺大疱;②各组大鼠肺泡灌洗液q,SIgA含 量测定结果:与正常组比较,COPD组的SIgA含量显著下降(Po.01),DM组和 3 山东大学硕士学位论文DM+COPD组的SIgA含量升高(Po.01);与COPD组比较,DM组、COPD+DM 山东大学硕士学位论文 DM+COPD组的SIgA含量升高(Po.01);与COPD组比较,DM组、COPD+DM 组SIgA含量显著升高(P0.01);DM组和COPD+DM组相比,差异无统计学意 义(PO.05)。 结论 (1)coPD组和DM组大鼠均有肺组织病理学的损害。 (2)COPD大鼠肺灌洗液中的SlgA水平较正常组明显减低,揭示气道粘 膜局部防御功能下降。 (3)DM大鼠及COPD+DM大鼠肺灌洗液中的SIgA增高,可能与晚期糖 基化产物免疫应答和对病原微生物的代偿性免疫增高有关,推测其 可能发生了结构或功能异常,以致不能发挥正常的呼吸道防御功 能。 关键词 慢性阻塞性肺疾病;糖尿病;模型,动物;支气管肺泡灌洗液;分泌 型免疫球蛋白A 4 山东大学硕士学位论文Determination 山东大学硕士学位论文 Determination of the concentration of SIgA in BALF in rats with chronic obstructive pulmonary disease and diabetes mellitus Postgraduate Li ting—tian Tutor Prof. Yang yah-ping Abstract objective To determine the concentration and differences of SIgA in bronchoalveolar lavage fluid(BALF)and observe the changes of pathological structure in lung tissue
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