佛波酯类化合物联合抗白血病药物对K562细胞的影响-药理学专业论文.docxVIP

lOj!4111144 原创性声明 本人郑重声明 z 所里交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研 究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任例其他个人 或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者: 日期: 年月日 学位论文使用授权声明 本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。 根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部 门成机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅:本人授权郑州 大学可以将本学位论文的余部成部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、 缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学 位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑 州大学。必威体育官网网址论文在解密后应遵守此规定。 学位论文作者: 日期: 年月日 中文摘要 佛波醋类化合物联合抗白血病药物 对 K562 细胞的影晌 研究生海莉丽 导师郭玉忠刷教授 乔梅灵教授 郑州大学基础医学院临床药理学教研室 ;可南郑州 450052 摘要 研究背景与目的 z 白血病是造血系统的思性肿瘤。目前临床上应用的白血病治疗的药物很多， 有一部分能够显著提高白血病的缓解率。但是由于严重的不良反应、个体差异 和耐药性的产生，使大部分抗白líII.病药物的疗效很不理想。近年来，诱导分化 剂的出现让我们看到了新的希望，有一些药物的疗效得到了肯定，许多诱导分 化剂只对一种或少数几种类型的白líII.病敏感，在 l临床的使用中受到了很大的限 制。因此，开发能够增加白血病疗效、减少毒副反应和耐药性的新药或联合治 疗方案成为目前最迫切的需要。 本论文通过体外的方法观察佛被酶类化合物 (12翩。十四烧酷佛被醇翩 13唰乙 酸酣， 12-0-tetradecanoylphorbol-13-acetate ，TPA 和 12-0-乙瞅佛被醉-13-樊酌酶， 12-0-acetylpho巾。1-13decanoate ，APD) 联合抗白血病药物(抗代谢类的阿糖胞 背， Cytarabine ，Ara-c 和细胞因子类的重组人粒细胞集落剌激因子， recombinant human granulocyte colony-stimulation factor ，由GCSF) 对 K562 细胞抑制增娟和 诱导分化两方面的影响，初步探讨佛波酣类化合物对白血病细胞的作用机制， 并为抗白血病新药的开发提供理论依据。同时，寻找新的能够提高慢性粒细胞 白血病疗效的药物联合治疗方案，为白血病的治疗提供新的途径。 中文摘要 研究方法 1 佛波醋类化合物联合Ar a-c 对 K562 细胞作用的影响 1. 1 细胞培养用 RPMI1ωo 培养基在 37.C ，5%C02 饱和混度的无菌培养箱中 常规培养，每 3 天传代 1 次。 1.2 TPA、APD、Aar心单用和合用的浓度效应关系测定及细胞形态学的观察 Mγr 的方法检测药物单独及联合作用后细胞抑制率的变化，分别于各细培养 24、 48、72h 后观察细胞形态学的变化， 1.3 TPA 或 APD 联合Ara心对细胞诱导分化作用的影响 收集各组细胞，分成 两份，一份加入 O.l%NBT 意悬孵商后，染色，镜下观察细胞分化阳性率。另一 份加入抗人单克隆抗体 CD15-F町C 和抗人单克降抗体 CD14-PE 避光孵宵后， 流式细胞仪检测。 2 TPA 联合由G-CSF 对 K562 细胞作用的影响 2.1 细胞培养用 RPMI1640 培养基在 37.C ，5%C02 饱和根度的无菌培养箱 中常规培养，每 3 天传代 1 次. 2.2 TPA 联合出ιCSF 对 K562 细胞增娟的影响及细胞形奋学的观察 Mγr 的 方法测定药物单用和联合作用后的抑制率，给制量效曲线，并进行统计学分析。 分别于各组培养 24、48、72h 后观察细胞形态学的变化。 2.3 TPA 联合血GCSF 对 K562 细胞分化的影响 NBT 还原试验和流式细胞仪 检测细胞分化成熟比率。 3 统计分析 结果采用 SPSSI0.0 统计软件进行数据分析，所有数据均用 x 土S 表示，采用单因素方装分析， (one-way ANOVA) 进行多细问均值比较。 PO.05 记为有统计学差异。 结果 1 佛波脂类化合物联合Ar a-c 对 K562 细胞作用的影响 1. 1 细胞形态学的影响 TPA 作用 72h 后，细胞聚集、折光率降低、体积变大、 向周围伸出伪足，一部分细胞蛊贴壁状态生长。高倍观察发现胞内出现许多小 气泡状物质，类似网球拍状。 APD